文档介绍：chap16糖类药物
第一节 糖类药物制备的一般方法
一：单糖及其衍生物的制备
游离单糖及小分子寡糖易溶于冷水及温乙醇。
可以用水或中性条件下以50%乙醇为提取溶剂，也可以以82%乙醇，在70-80摄氏度下回流提取。
二：多糖chap16糖类药物
第一节 糖类药物制备的一般方法
一：单糖及其衍生物的制备
游离单糖及小分子寡糖易溶于冷水及温乙醇。
可以用水或中性条件下以50%乙醇为提取溶剂，也可以以82%乙醇，在70-80摄氏度下回流提取。
二：多糖的分离于纯化
多糖可来自动物、植物和微生物。来源不同提取方法也不同。
植物体内含有水解多糖衍生物的酶，必须抑制或破坏酶的作用后，才能制取天然存在形式的多糖。
速冻冷藏是保存提取多糖材料的有效方法。
提取方法依照不同种类的多糖的溶解性质而定。
（－）多糖的提取
提取多糖时，一般先需进行脱脂，以便多糖释放。方法是将材料粉碎，用甲醇或1∶1乙醇***混合液，加热搅拌1～3小时，也可用石油醚脱脂。动物材料可用***脱脂、脱水处理。
1、难溶于冷水、热水，可溶于稀碱液者
多糖的提取方法主要有以下几种：
这一类多糖主要是不溶性胶类，如木聚精、半乳聚糖等。／L NaOH提取，提取液用盐酸中和、浓缩后，加乙醇沉淀得多糖。
如在稀碱中仍不易溶出者，可加入硼砂，对甘露聚糖、半乳聚糖等能形成硼酸络合物的多糖，此法可得相当纯的物质。
2、易溶于温水、难溶于冷水和乙醇者
材料用冷水浸过，用热水提取，必要时可加热至80～90℃搅拌提取。
3、粘多糖
提取液用正丁醇与***仿混合液除去杂蛋白（或用三***乙酸除杂蛋白），离心除去杂蛋白后的清液，透析后用乙醇沉淀得多糖。
有些粘多糖可用水或盐溶液直接提取，但因大部粘多糖与蛋白质结合于细胞中，因此需用酶解法或碱解法使糖-白质间的结合键断裂，促使多糖释放
一般组织中存在多种粘多糖。需要对粘多糖进行分离纯化 。
（1）碱解法 多糖与蛋白质结合的糖肽键对碱不稳定，故可用碱解法使糖与蛋白质分开。
但若硫酸基与邻羟基处于反式结构或硫酸基在C-3或C-6，此时易发生脱硫作用。这类多糖不宜用碱解法提取。
（2）酶解法 理想的工具酶是专一性低的、具有广泛水解作用的蛋白酶。鉴于蛋白酶不能断裂糖肽键及其附近的肽键，为除去长肽段，常可与碱解法合用。
常用的酶制剂有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和链霉菌蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶。
（二）多糖的纯化
试剂和器材
一、试剂
平衡缓冲溶液： Tris-HCL, PH=。
洗脱液：A: NaCl, mol Tris-HCl PH=; B: NaCl, mol Tris-HCl PH=。
***仿、正丁醇、乙醇(95％)等，均为分析纯。
二、材料
灰树花子实体。
三、
器材
DEAE Sepharose Fast Flow，旋转真空蒸发仪，摇床，离心机，层析柱：26×10
操作方法
一、粗多糖的提取
将多糖子实体切碎烘干后称量，采用热水浸提法，每次原料和水之比均为1：5，浸提温度为70℃－80℃，浸提时间3－5h，共提取4次，合并4次浸提液。真空旋转蒸发浓缩，浓缩一倍体积。对多糖提取液需进行脱色处理，即以1％的比例加入活性炭，搅拌均匀15min后过滤即可。在浓缩液中加入3倍体积的乙醇搅拌，沉淀为多糖和蛋白质的混合物，此为粗多糖。 它只是一种多糖的混合物，其中可能存在中性多糖、酸性多糖、单糖、低聚糖、蛋白质和无机盐，必须进一步分离纯化。
二、粗多糖的纯化
粗多糖溶液加入Sevag试剂(***仿：正丁醇＝3：1混合摇匀)后，置恒温振荡器中震荡过夜，使蛋白质充分沉淀，离心(3000r／min)分离，去除蛋白质。然后浓缩，透析，加入4倍体积的乙醇沉淀多糖，将沉淀冻干。
Tris-HCL, PH=。上样，用Buffer A: NaCl, mol Tris-HCl PH=; Buffer B: NaCl, mol Tris-HCl PH= 进行线性洗脱，分部收集。各管用硫酸苯酚法检测多糖。合并多糖高峰部分，浓缩后透析，冻干，即得多糖级分。
第二部分多糖的鉴定 实验原理
采用薄层层析法分析单糖组分。薄层层析显色后，比较多糖水解所得单糖斑点的颜色和Rf值与不同单糖标样参考斑点的颜色和Rf值，确定样品多糖的单糖组分。
多糖的分析鉴定一般借助于气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR