文档介绍：实验方案的格式
实验方案的格式
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实验方案
一.【实验题目】：
土壤中细菌的分别纯化实验
二.【实验设计思想】：
细菌是拥有
调节
PH
值：初配好
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的牛肉膏蛋白胨培养液是微酸性的，
-。为防备调解时过碱，应迟缓加入
NaOH
故需用1mol/LNaOH
液，即要边滴加NaOH边搅
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匀培养液，然后用PH试纸侧其酸碱度值。检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加
1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。若偏
碱，则用
1mol/LHCl进行调节。pH的调节平时放在加琼脂从前。应注意pH值不要调过头，以
免回调而影响培养基内各离子的浓度.
.过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利结果的察看。但是供一般使用的培养基?此步可省略
分装:披实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。分装时可用三角漏斗省得使培养基沾在管口或瓶口上面造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面。分装入三角瓶内以不超过其容积内一半为宜。半固体培养基以试管高度的1/4为宜?灭菌后垂直待凝。
.加棉塞试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞，棉塞的形状、
大小和松紧度要合适，四周紧贴管壁，不留缝隙，才能起到防备杂菌侵
入和有利透气的
作用。要使棉塞总长约3/5塞人试管口或瓶口内，以防棉塞脱落。有些微生物需要更
好的透气，则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料盖代替棉塞。(8)包扎:加塞后，将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸，以防灭菌时冷凝
水沾湿棉塞。若培养基分装于试管中，则应先把试管扎成捆后，再于棉塞外包—层牛
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皮纸。然后用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
(9)灭菌:将上述培养基于12「C湿热灭菌20min。如因特殊情况没能实时灭菌，则应
放人冰箱内暂时保存.
?摆斜面灭菌后，待培养基冷却至50—60C,然后制斜面，则需趁热将试管口端搁在一根长木条上，并调整斜度，使斜面长度不超过试管总长的一半.
.无菌检查：将灭菌的培养基放入37C温箱中培养24-48h,无菌生长时可以使用,或放置在冰箱或清洁的橱内，备用.
配置无菌生理盐水：
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称
至盛有
100ml
蒸馏水的三角瓶中，塞上棉塞，塞外包上一层牛皮
纸，
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至加压蒸汽灭菌锅内在
121C
下灭菌
20min
即为无菌生理盐水。
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取样并制备土壤稀释液：
1）.土壤前办理；取出采集的土样，去除其中较大的杂质，将其撵碎、撵细待用。
（2）制土液：称出10克于带有无菌玻璃珠的250ml锥形瓶中，用已灭菌的量筒量
取90ml无菌水溶解，振摇约20分钟，使土样与水充分混匀。点燃酒精灯在火焰附
近，用无菌移液枪从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，
然后用无菌移液枪今后试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混杂均
匀，以此类推制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6不同稀释度的土壤溶液。
：
将上述9个平板分别贴上标签10-4、10-