文档介绍：辐照灭菌确认方案
文件编码：VOI-HMH002-F版本号：002 / 13
#####有限公司
研发部
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辐
照
灭
菌
确
认
方
案
文件编码：VOI
平均数
批平均初始污染菌为 （cfu/件）
总平均初始污染菌为 （cfu/件）
根据ISO11737-1中描述的初始污染菌的确定方法进行试验，测定校正因子，
文件编码：VOI-HMH002-F版本号：008 / 13
该因子取自对活菌计数的初始污染菌检测技术的验证。
测定依据：ISO11737-1:1995
试验方法：
标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372），传代培养，制成100cfu/ml备用。
洗脱液准备：***化钠-蛋白胨缓冲液：，，***，，加水1000ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。
制备悬液稀释液，。，并在层流下进行干燥。
用洗脱液对接种的产品进行洗脱，测定洗脱的芽孢数，并计算平均值。100除以平均芽孢数即为回收率的校正系数。
样品编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
芽孢数
平均芽孢数：
校正系数：
产品释出物的检验
测定依据：ISO11737-1：1995
试验方法：
1)标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）,白色念珠菌（ATCC10231），传代培养，制成100cfu/ml备用。
文件编码：VOI-HMH002-F版本号：009 / 13
2)产品处理：取灭菌产品以无菌操作转移到100mlSCDB培养基中，30～35℃培养24h。
3)接种：以无菌操作接种标准菌于上述产品SCDB培养基中，28～32℃培养出现阳性结果或是至少培养7天。用标准平板计数法进行微生物计数（CFU）。
结果：
微生物
ATCC
接种量（cfu）
产品＋SCDB＋标准菌
对照SCDB+标准菌
枯草杆菌黑色变种
9372
白色念
珠菌
10231
结论： 。
建立验证剂量
根据初始污染菌的结果和ISO11137：2006方法1中的表5，建立合适的验证剂量。具体方法为：
如果一批或更多批次平均初始污染菌等于或大于总平均初始污染菌的两倍，则使用最高批次值；
如果批次平均初始污染菌的每一个小于总平均初始污染菌的两倍，则使用总平均初始污染菌。
根据初始污染菌的测定试验结果，得到该产品三批的批平均初始污染菌和总平均初始污染菌分别为 （cfu/件）和 （cfu/件），最高批次值为 （cfu/件），因此选择 （cfu/件）作为初始污染菌。
根据11737-，故产品的生物负载估计值为： （cfu/件）。
文件编码：VOI-HMH002-F版本号：0010 / 13
按照ISO11137 方法1中的表5查得该校正过的初始污染菌对应的验证剂量为 kGy (SAL=10-2)，指定这个剂量作为灭菌剂量。如果平均初始菌在表5中没有给出，则用比实际计算的初始污染菌大些的，最接近表中数值的平均初始污染菌。
完成验证剂量试验
从批次 产品中选择100件产品进行验证剂量试验，在浙江佳翔辐照技术有限公司进行辐照。，所照剂量用该公司放置的剂量计测定剂量，保证所测剂量落在规定剂量的±10%之内。最高剂量不能超过灭菌验证剂量的10%，如果计算的辐照样品的平均剂量少于验证剂量的90%，则验证剂量实验要重做。如果样品吸收剂量比验证剂量的90%少，并且实施无菌实验时，观察到的结果是可接受的（100个无菌试验的阳性个数不超过2个，则验证可以接受），则验证实验不需重做。
应说明剂量计布放示意图，每一剂量计的测定数据，并通过数据判定所测计量是否在规定剂量的范围内。由于本公司辐照灭菌属委托加工，该部分实验报告可由委托加工公司出具。
剂量计测定结果判定合格后，对经辐照处理的样品进行无菌检验。
试验依据：ISO11732:1998
试验方法：
1)样品测试接种均应按无