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滤膜法测定总大肠菌群.docx

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文档介绍

文档介绍:滤膜法测定总大肠菌群
1主题内容与适用范围
本方法规定了生活饮用水中总大肠菌群的滤膜测定方法。
本方法适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定。
2方法提要
,细菌被截留在滤膜上,滤膜法测定总大肠菌群
1主题内容与适用范围
本方法规定了生活饮用水中总大肠菌群的滤膜测定方法。
本方法适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定。
2方法提要
,细菌被截留在滤膜上,将滤膜贴在选择性培养 基上,经培养后,计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。
3培养基与试剂


A蛋白胨10g
B酵母浸膏5g
C牛肉膏5g
D乳糖10g
E琼脂15〜20g

G无水亚硫酸钠5g左右
H碱性品红乙醇溶液(50g/L) 20mL
I蒸馏水1000mL

先将琼脂加到500mL蒸馏水中,煮沸溶解,于另500mL蒸馏水中加入硫酸氢二钾、蛋 白胨、酵母浸膏和牛肉膏,加热溶解,倒入已溶解的琼脂,补充蒸馏水至1000mL,混匀后 ~,再加入乳糖,分装,115°C高压灭菌20min,储存于冷暗处备用。

将上法制备的储存培养基加热融化,用灭菌吸管按比例吸取一定量的5%碱性品红乙醇 溶液置于灭菌空试管中,再按比例称取所需的无水硫酸钠置于另一灭菌试管中,加灭菌水少 许,使其溶解后,置沸水浴中煮沸
10min以灭菌。
用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液,滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色退成淡粉色 为止,将此亚硫酸钠与碱性品红的混合液全部加到已融化的储存培养基内,并充分混匀(防 止产生气泡),立即将此种培养基15mL倾入已灭菌的空平皿中。待冷却凝固后置冰箱内备 用。此种以制成的培养基于冰箱内保存不宜超过二周。如培养基已由淡粉色变为深红色,则 不能再用。


A蛋白胨10g
B牛肉膏3g
C乳糖5g
D***化钠5g
E漠甲酚紫乙醇溶液(16g/L) 1mL
F蒸馏水1000mL

将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及***化钠溶于蒸馏水中,调整^〜,% 漠甲酚紫乙醇溶液,充分混匀,分装于装有倒管的试管中,115°C高压灭菌20min,贮存于 冷暗处备用。
4仪器

,~,。


培养箱:36±1C。
:0〜4C。


:直径为9cm。
:1mL,10mL。
5检验步骤


将滤膜放入烧杯中,加入蒸馏水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15min