文档介绍:一、增殖、分化培养基的筛选
1材料与方法
原球茎为实验室培养(MS+ NAA+10%香蕉)
表1影响因素与水平的设定
水平
培养基
NAA(mg/L)
马铃薯提取分化培养基以5号,即1/2MS+ NAA+20%马铃薯为佳。
二原球茎辐照特性
第一次辐照
辐照时间:2008年2月29日
统计时间:2008年4月11日
培养基:1/2MS+ mg/L6-BA+ mg/LNAA
统计项目:存活率
表6不同剂量照射后原球茎存活率
剂量(Gy)
各重复存组活率
总存活率(%)
CK
4/4,8/8,8/8,9/9,9/9,5/5
100
25
4/7,5/6,5/8,5/7,7/9,6/6,2/5
50
3/9,6/7,4/7,1/6
75
3/7,3/4,4/5
100
3/7,10/13,5/10,4/9
125
4/6,1/5,7/7,3/7,10/11,5/6
75
150
0/5,1/3,6/12,3/7,2/4
0
0 25 50 75 100 125 150
剂量(Gy)
图2石斛原球茎的剂量效应曲线
第二次辐照
辐照时间:2008年4月4日 统计时间:2008年6月25日
培养基:MS+20%马铃薯
统计项目:存活率
剂量(Gy)
100
80
)
%(
60
率
活
40
存
20
0
表7不同剂量照射后原球茎存活率
剂量(Gy)
各重复存组活率
总存活率(%)
CK
100
40
6/9,6/7,7/11,5/8,5/8,1/7,8/9,4/5,7/8,5/5,7/7
80
1/6,0/10,3/5,0/6,0/8,5/6,2/10,0/10,2/4,0/10
120
1/7,4/6,4/7,3/8,3/6,0/8,1/7,5/8,1/6,0/8,0/9,2/9
23
160
1/7,0/10,1/6,0/6,6/9,8/9,0/6,0/9,4/9,4/6,6/8
200
0/8,0/8,0/9,1/8,2/8,6/9,3/6,4/8,0/8,0/8
16
图3石斛原球茎的剂量效应曲线
三石斛抗逆性实验
(一)、真菌、细菌返接实验
1抗菌实验
细菌:X-1-Y、X-2、X-1-R、ER2,平板培养
真菌:1-1、7(分离自石斛茎部),平板培养
石斛分化苗(自分化培养基)
将以分化的石斛苗(4-5株)转入生根壮苗培养基中(MS+2mM NAA+10% 香蕉),培养约7天后,用接种环挑取带菌琼脂块将X-1-Y、X-2、X-1-R、ER2、 1-1、7转入石斛苗基部。各瓶接中3块,均匀分布于石斛苗周围。
2结果
图4真菌与石斛共培养(从左至右为:CK、1-1、7,接种后14 d)
图5真菌与石斛共培养(从左至右为:CK、1-1、7,