文档介绍：实现对单个细胞的多参数分析
胡凡 江苏省南京医科大学分析测试中心,江苏南京210029
【摘要】流式细胞仪经过多年的不断发展和改进,现在已经广泛地应用在各个领域。本文主要讲述了流式细胞仪工作原理和检测的特点,并从病毒抗原、抗实现对单个细胞的多参数分析
胡凡 江苏省南京医科大学分析测试中心,江苏南京210029
【摘要】流式细胞仪经过多年的不断发展和改进,现在已经广泛地应用在各个领域。本文主要讲述了流式细胞仪工作原理和检测的特点,并从病毒抗原、抗体检测;白细胞分类分析;免疫相关检测;细胞周期和凋亡检测四个方面阐述了流式细胞仪在医学检验中的应用。
【关键词】流式细胞仪;应用
【中图分类号】【文献标识码】A文章编号:1004-7484(2012)-05-1138-02流式细胞仪是一种集细胞荧光化学技术、光电测量技术、单克隆抗体技术、电子物理技术、计算机技术以及激光技术为一体的检测仪器。流式细胞仪是近代电子计算机技术、分子免疫学、激光技术、分子生物学、单克隆抗体技术等高度发展、综合的结晶。
流式细胞仪的基本结构主要包括三大系统,即光学系统、液流系统和数据处理系统。流式细胞仪采用激光作为激发光源,利用单克隆抗体和荧光染料结合的标记技术,并用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析,从而保证了快速检测,具有较好的激发效率和单***,实现了统计分析的精确性,保证了检测的特异性和灵敏度。
流式细胞仪可以对任何单细胞悬液进行检测,同时只要标本中的细胞数量足够,可以在极短时间内分析大量细胞,测量的细胞总数可达数百万个。流式细胞仪可同时分析单个细胞的多种特征,实现对单个细胞的多参数分析,同时通过荧光染色对单细胞的受体表达量、DNA含量等进行定量与定性分析。
、抗体检测。流式细胞仪可以对任何单细胞悬液进行检测,所以可以检测受病毒感染的尿标本、血液等细胞。流式细胞仪可同时分析单个细胞的多种特征,实现对单个细胞的多参数分析,所以对单个受感染的细胞可分析多个参数数据。流式细胞仪可在极短时间内分析大量细胞,所以可检测出同一样本中的多种病毒或病毒抗原[1]。流式细胞仪结合微球杂交法可同步检测同一反应管中人类免疫缺陷病毒、丙肝病毒、乙肝病毒的数目和种类。
。利用流式细胞仪进行白细胞分类分析准确、迅速,可显著提高临床检验的工作效率[2]。流式细胞仪进行白细胞分类分析的原理:细胞核形状、细胞体积等与光散色强度有相关性。而流式细胞仪利用细胞结构测定和体积测定来检测白细胞的光散色强度,经过分析就可得出白细胞分类结果。
。流式细胞仪用于免疫相关检测,主要包括各种免疫细胞的表面标志,细胞分选;细胞因子的检测;HLA群体分型、细胞增殖等。
流式细胞仪通过对淋巴细胞免疫表型的分析,能了解淋巴细胞的分化、功能,鉴别新的淋巴细胞亚群,从而对肿瘤、免疫性等疾病的诊断和治疗有重要的临床意义。检测细胞因子方法主要是结合膜表面抗原染色[3],通过细胞因子的特异性单克隆抗体进行细胞内免疫荧光染色,用多重染色流式细胞技术分析细胞因子,并根据各类细胞所产生的细胞因子种类的差别