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第5章CellQuestPro软件.pdf

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第5章CellQuestPro软件.pdf

上传人:buzaiwuzhuang123 2022/8/10 文件大小:1.26 MB

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est Pro 文件类型
FCS 数据文件
是流式细胞仪的标准格式数据文件。FCS 数据文件中自动保存了每个微粒所有的参数
信息和对应的仪器条件。当 Aqusition Control 窗口的 set up 前未打 时,进行获取后自动
保存的文件格式。该文件含有从流式细胞仪获取的平均 2000-10000 个颗粒数的数据。一个
含有 4 参数 10000 细胞数的数据文件若 256 道分辨率则文件大小为 45kb,若 1024 道分辨
率则文件大小为 85kb。
实验文件
实验中设置的图、区域、门、统计结果、marker、文字、颜色 等都将保存。数据文件
不在实验文件中保存。CellQuest Pro 实验文件的菜单有 File 菜单下 New、open、close、
save 及 save as 等(同 Microsoft Word)。
注意:实验文件和它的数据文件之间存在一定限制。若数据文件未改变地址或未被删除,实验文件
可找到其数据文件。若二者联系丧失,需将丢失的数据文件与其实验文件放在同一目录,实验文件才能
找到其数据文件。若实验文件的目录改变,二者的联系不会改变,实验文件仍可找到其数据文件。
实验文件可以后打开以恢复获取和分析。
实验文件可以通用模板储存以用于常规获取和分析。除数据文件外所有条件(包括 region、gate、
statistics)都可以通用模板储存。
实验文件可转化为文具薄。
在实验文件中,有 3 种图:获取、分析和获取到分析。一个实验文件可含上述 3 种图的组合,但获
取图不能用来分析,分析图不能用来获取。 仪器条件文件
实验条件文件中包括仪器的电压,阈值,补偿等仪器条件。这些条件也已经自动保存
在 FCS 数据文件中的文档部分。也可以单独保存成一个仪器条件文件。
统计文件
所有直方图、区域、门和象限统计结果都可以输出成表符限制性文档。这些输出文件
可用于将数据转移到其他应用软件中,如电子表格或数据库。
CellQuest Pro 的仪器控制
在 CellQuest Pro 软件中,仪器的控制选单位于 Cytometer 菜单中。用 CellQuest Pro 进行 3 色分析
中,应用阴性对照和调补偿用对照进行仪器条件设置。阴性对照可用不加抗体组或同型对照组。它将用
于调节 FSC、SSC 探测器、FSC 阈值、设淋巴细胞区 region、确认 FL1/FL2/FL3 的设置及象限设置。
调补偿用对照包括单阳性荧光试剂,如包括下列试剂:CD8 FITC 组、CD19 PE 组、CD3 PerCP 组。
调节探测器和放大器可使所需信号出现在数据图的适当位置。细胞通过激光束时产生光信号,然后转
换成电信号,并在散点图上相对应于一个道值。依据所选的分辨率的不同,道值有 0-255、0-1023 不同
范围。
探测器(Detector)
在流式细胞仪中有二种探测器:光电二极管和光电倍增管 (PMTs)。 光电二极管对光 的敏感度低于
光电倍增管。探测器的调节菜单位于 Cytometer 菜单下 Detector/Amps,