文档介绍：电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术
二、诊断病理学
三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用
四、讨论
（一）概念
电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术
二、诊断病理学
三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用
四、讨论
（一）概念
电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微术
概念
电子显微镜技术
电镜精密仪器
样品制备技术
1、电子显微镜 ：是用电子束成像的显微镜，电子显微镜是一种高精密度的电子光学仪器，它具有较高分辨率本领和放大倍数，是观察和研究物质微观结构的重要工具。
发明背景：它是在发现电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发明出的。
电子显微镜主要分为两种类型：一种是观察样品内部超微结构的透射电子显微镜，另一种是揭示样品表面形貌的扫描电子显微镜。
电子显微镜特征：电镜与光镜的区别
扫描电镜与透射电镜比较：（见下表）
扫描电镜和透射电镜比较
项目
扫描电镜
透射电镜
分辨本领
70～100 Å
2 Å
发大倍数
20～40万倍
100万倍
加速电压
1～50 KV
几十千伏～几百千伏
图像特点
景深长、三维立体结构
景深小、两维平面结构
样品制备
固定-脱水-临界点干燥-喷涂金属
固定-脱水-包埋-超薄切片-重金属染色
样品尺寸
1cm3
50～100nm切片
样品损伤
光斑直径只有几十埃的电子束在
样品上扫描，对样品损伤极小
大约1μm直径电子束打到样品上，造成一定程度损伤
样品成像信号
二次电子、背散射电子
透射电子
发大倍数调节
用衰减器改变扫描线圈电流，进
行放大率调节
调整中间镜电流改变放大率
决定分辨率因素
入射电子束直径决定图像分辨率。
加速电压、透镜缩小率、电源稳定度及像差决定电子束斑直径
加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度等影响分辨率
本图片来自中科科仪
本图片来自中科科仪
2、样品制备
透射电镜样品制备的常用方法：包括超薄切片、冷冻复型、负染色等。
扫描电镜样品制备：比透射电镜样品制备简单。除保存样品表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，而不需包埋和切片。制备方法与透射电镜样品制备方法一样 。
图1 朗格汉斯细胞组织细胞增生症:见双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。 EM ×10 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏, .
临床与实验病理学杂志;2019 ;15（5）
（二）电镜检查起参考和修正作用：电镜获得的信息对光镜结果予以补充或修正,最终做出最后病理诊断。
例：男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大,再次淋巴结(颌下) 活检病理诊断为恶性淋巴瘤(免疫母细胞型) 。电镜:瘤细胞大、多边形或不规则形,核质比大,核膜弯曲,不规则或奇特的内陷,核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质突,胞质内核糖体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发育不良的桥粒样连接(图2) 。最后病理诊断为颌下淋巴结转移癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。此例电镜有确诊价值。
图2 转移癌:瘤细胞大、长圆形,胞核大、梭形,核膜不平滑,显著增大的核质比质膜间有桥粒样连接,胞质含少许欠发达的细胞器,网栏状大核仁,两团染色质间颗粒。EM ×10 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏, .
临床与实验病理学杂志;2019 ;15（5）
（三）电镜检查起验正作用：超微结构信息进一步证实、丰富了光镜的组织学诊断
例：男,30 岁,肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽未见典型碎屑样坏死,但不除外活动性变化。电镜见肝细胞大,疏松,细胞周围间隙加大,有微绒毛化,滑面内质网增生,内含管状体,肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶,周围有淋巴细胞浸润。最后电镜诊断:慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻微活动(图3) 。电镜有确诊价值。
图3 慢性迁延性乙型病毒性肝炎:滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。EM ×8 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏, .
临床与实验病理学杂志;2019 ;15（5）
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术
二、诊断病理学
三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用
四、讨论
四、讨论
国内外对电镜诊断的价值,在肿瘤应