草地贪夜蛾抗药性监测技术规范DB34T4208-2022.pdf

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ICS
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试虫的采集和饲养
选取代表性玉米田 3 块～5 块，每块田采用“W”型五点取样，每个监测点采集草地贪夜蛾卵块 200
块以上，或采集幼虫、蛹 500 头以上，或利用诱虫灯诱集活成虫 200 头以上。采集的卵块孵化后，幼
虫生长至 3 龄初，可直接用于生物测定。其他虫态室内饲养至 F1 代，3 龄初幼虫用于生物测定。饲
养条件为（26±1）℃，相对湿度为 40％～70％，光周期L/D= 16h/8h，幼虫采用人工饲料饲养，人工饲
料的配方参见附录A所示，成虫饲喂 10％ 蜂蜜水。
药剂的配制
母液配制
准确称取一定量的杀虫剂原药，用***或二***亚砜等有机溶剂溶解，配制成母液。
饲料混毒法
使用同一溶剂稀释母液，配制系列浓度的工作液，再与人工饲料按照质量比 1:99 均匀混合，加入
药液量不少于 2 g。
点滴法
用同一溶剂将母液稀释为系列浓度的工作液，每个浓度药液量不少于2 mL。
浸叶法
将母液用 ％ Triton-100 水溶液梯度稀释至工作液浓度，每个浓度药液量不少于 400 mL。
测定方法
方法的选择
根据防治药剂的作用特点和作用方式，选择饲料混毒法、点滴法和浸叶法等。
饲料混毒法
选取生长一致、健康的3龄初幼虫作为试虫。在 12 孔培养板中加入适量混毒人工饲料，并接入 1
头试虫。12 头为一个重复，每个浓度重复 3 次；每个药剂设置 5 个～7 个浓度梯度。以添加相同溶
剂处理的饲料作为对照。处理后的试虫转移至（26±1）℃、相对湿度为 40％～70％、光周期L/D=16h/8h
的条件下饲养。
点滴法
选取生长一致、健康的 3 龄初幼虫作为试虫。用微量点滴器将 μL 药液点滴在幼虫的胸部背
板，从低浓度到高浓度依次处理。12 头试虫为一个重复，每个浓度重复 3 次，每个药剂设置 5 个～
7 个浓度梯度。以点滴相同溶剂的试虫作为对照。处理后的试虫转移至 12 孔培养板饲养，每孔 1 头，
并加入适量人工饲料或新鲜玉米叶片，于（26±1）℃、相对湿度为 40％～70％、光周期L/D=16h/8h的
条件下饲养。
浸叶法
选取生长一致、健康的 3 龄初幼虫作为试虫。采集未接触任何农药的新鲜玉米叶片，用打孔器打
成直径略小于 12 孔培养板孔径的叶碟，浸入待测药液中 10 s，取出置于吸水纸自然晾干，每孔放入
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3 个叶碟，接入 1 头试虫。12 头试虫为一个重复，每个浓度重复 3 次，每个药剂设置 5 个～7 个
浓度梯度。以相同溶剂的 ％ Triton-100 水溶液处理的叶碟饲喂组为对照。处理后的试虫转移至
（26±1）℃、相对湿度为 40％～70％、光周期L/D= 16h/8h的条件下饲养。
药剂处理后的检查时间
根据药剂发挥作用的快慢确定检查时间。***虫苯甲酰***和溴***虫酰***，处理后 48 h 检查结果；乙
基多杀菌素处理后 72 h 检查结果；虱螨脲处理后 96 h 检查。试虫触碰无反应或不能协调运动，或处
理组草地贪夜蛾体长小于对照组体长一半以上，即判定为死亡。。
统计分析
利用SAS、SPSS、POLOplus等软件，采用浓度对数-机率值分析法，计算LC50值及其 95％ 置信限、
斜率±标准误（b±SE）、卡方值和自由度，。
7 抗性水平的判断
抗性倍数的计算
参照 NY/T 2058、NY/T 2916 和 NY/T 3539 的规定，根据敏感品系的LC50值（S）和监测地区种群
的LC50值（T