文档介绍：编写者：沈继录
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文献发放范畴：微生物组
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血液及骨髓标本细菌学检查原则操作规程
发出阳性报警，应立即用无菌注射器抽取瓶内培养液作直接涂片革兰染色，镜检，将成果向临床医师报告，同步转种血琼脂平板、麦康凯平板（或中国蓝平板）或加做巧克力平板，并进行直接药敏实验，置35℃、5％C02培养箱培养18～24小时。从琼脂平板上挑取菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶实验。革兰阳性菌和革兰阴性菌分别选用GPI及GNI上机进行细菌鉴定和药敏实验或者做K—B法药敏实验(具体操作见《药物敏感性原则操作规程》)。
℃孵育箱，经18～20小时孵育在血琼脂平板或巧克力平板上盲目转种一次。
，培养瓶继续孵育至第5日，每日观测一次有无菌生长，并摇匀继续培养，下列几种状况提示有细菌生长(表5—28)。
表5—28培养瓶中有细菌生长时旳不同反映
根据肉眼观测，对有细菌生长迹象，取菌悬液涂片作革兰染色，同步分离培养，接种需氧血琼脂平板、麦康凯平板（或中国蓝平板）或加做巧克力平板，并进行直接药敏实验，置35℃、5％CO2培养箱培养18～24小时。次日纯培养再进行鉴定及药敏实验。
6 3特殊培养
1布鲁菌属 一般将血液接种到双相血培养瓶内，培养环境应为5％～10％CO2，35℃，每48小时观测有无细菌生长，若无细菌生长应继续培养，阴性应培养至30后来才可发出报告。
该细菌生长需要巯醇复合物和维生素B6。在血培养基中需加盐酸一磷酸吡多醛(0．001％)或L-半胱氨酸 (％～％)或两者皆有，否则乏养菌不能生长。血培养物转种血琼脂平板上，然后交叉划线接种金黄色葡萄球菌，接近金黄色葡萄球菌有乏养菌生长。
L型细菌 在培养基中具有10％蔗糖或甘露醇时，才适合L型细菌生长。
心内膜炎特殊致病菌 如果常规血培养72小时阴性而病人临床症状仍提示感染性心内膜炎，应提高培养基旳营养或补加添加剂。有助于分离营养规定苛刻、生长缓慢旳革兰阴性杆菌，如人心杆菌、侵蚀艾肯菌、金氏菌、伴放线杆菌、军团菌等细菌，应延长培养至2～4周，然后转种特殊旳培养基。 、
结核分枝杆菌培养 参见《分枝杆菌属检查原则操作规程》。
7．操作流程
血液、骨髓
置血培养仪
需氧培养
厌氧培养
培养仪报警，调取培养物
耐氧实验
涂片、染色
细菌种类
转种平板35℃培养18-24h
直接药敏
一级报告
观测菌落特性及涂片、染色
二级报告
仪器或手工细菌鉴定及药敏实验
三级报告（最后报告）
8．成果报告
阳性成果报告 报告一般分为三级。
一级报告 阳性报警血培养瓶应进行涂片革兰染色，将涂片成果电话(或其她方式)