文档介绍:题 目:菠菜色素的提取与分离
姓 名: 王祖喜
学 号:1105977
学 院:生命科学与技术学院
专 业:生物技术
题 目:菠菜色素的提取与分离
姓 名: 王祖喜
学 号:1105977
学 院:生命科学与技术学院
专 业:生物技术
年 级:级
班 级:1班
指引教师:张永明
时 间:5月20日
菠菜色素的提取与分离
内蒙古师范大学生命科学与技术学院级生物技术1班 王祖喜
指引教师 张永明
摘 要:本实验用研钵和体积比为 7:3 石油醚-乙醇提取色素, 使用硅胶柱层析法对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行分离。实验成果表白,所提取的成果与实际成果极为接近。
核心字:色素;石油醚-乙醇;硅胶柱层析法
菠菜叶中具有叶绿素、胡萝卜素、和叶黄素等多种天然色素. 叶绿素是植物进行光合伙用所必需的催化剂, 也是食用的绿色色素, 可用于糕点、饮料水等中, 添加于胶姆糖中还可消除口臭. 胡萝卜素的三种异构体中B-异构体具有维生素A 的生理活性, 可替代维生素A 使用, 也可作为食品工业中的色素使用, 最新研究报道, B-胡萝卜素尚有防癌功能. 叶黄素是胡萝卜素的羟基衍生物, 在光合伙用中能起收集光能的作用. 由此可见, 叶绿素等天然色素有广泛的用途, 对于色素的提取与分离就显得很重要了[1]. 本文采用硅胶柱层析的措施分离色素。
1 实验原理
绿色植物如菠菜叶中具有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。叶绿素存在两种构造相似的形式即叶绿素 a(C55 H72O5N4Mg) 和叶绿素 b(C 55H70O6N4Mg) ,其差别仅是 a 中一种甲基被 b 中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合伙用所必需的催化剂。植物中叶绿素 a 的含量一般是 b 的 3 倍。尽管叶绿素分子中具有某些极性基团,但大的烃基构造使它易溶于醚、石油醚等某些非极性的溶剂。胡萝卜素( C40H56 )是具有长链构造的共轭多烯。它有三种异构体,即 a-,
β - 和γ - 胡萝卜素,其中β - 异构体含量最多,也最重要。在生物体内,β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素 A 使用,也可作为食品工业中的色素。 叶黄素( C40H56O2 )是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量一般是胡萝卜素的两倍。与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
本实验从菠菜中提取上述几各色素,并通过柱层析进行分离。整个实验的工艺流程为:菠菜→研磨离心→菠菜汁→石油醚乙醇萃取→萃取液→纯水洗涤、无水硫酸钠干燥→石油醚浸膏→柱层析→色带→洗脱→色素回收[2]。
硅胶柱层析的流程为: 层析柱准备→装柱→柱平衡→上样→色素洗脱[2]。
2 实验仪器、试剂与材料