文档介绍：答辩铁皮石斛多糖
组培铁皮石斛多糖的提取
3.
组培铁皮石斛 水回流提取 浓缩
;
A0 为空白对照的吸光值。
13
组培铁皮石斛多糖抑制超氧阴离子自由基的能力
试验中采用邻苯三酚自氧化—分光光度法测定抑制超氧阴离子自由基的能力。
加入样品前：-HCl缓冲液和50 -1邻苯三酚在25℃的恒温水浴锅中保温，取5mL -HCl缓冲液，加30μL 50mmol/L邻苯三酚，摇匀，在325nm下立即测定。-HCl缓冲液为空白， min测一次吸光值，计算出平均值A0。
加入样品后：取5mL -HCl缓冲液，加待测样品5～60 μg、30μL 50mmol/L邻苯三酚，摇匀，立即同上测定。-HCl缓冲液为空白， min测一次吸光值，计算出平均值A1。
抑制率= [ (A0 - A1)/A0 ] ×100% ②
式中：A1 为加入待测物后的吸光值;
A0 为空白对照的吸光值。
14
组培铁皮石斛多糖清除DPPH自由基的能力
3. DPPH标准曲线的绘制
，加甲醇溶解定容至50mL，作为储备液。精密移取上述储备液10mL至100mL容量瓶中，·L－1的储备液备用。、、、、、、、、，用甲醇定容至刻度，摇匀，以甲醇溶剂作参比，在515nm处测定各溶液的吸光度。以DPPH的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
配制DPPH标准溶液系列，绘制出DPPH标准曲线见图6。标准曲线线性回归方程为y = + ，在DPPH质量浓度为2～16mg·L－1线性关系良好。
15
组培铁皮石斛多糖清除DPPH自由基的能力
(200～800μg)样品待测物，，混匀放置40min后，用1cm比色皿于515nm处测定吸光度，根据DPPH标准曲线回归方程计算DPPH质量浓度，按下列公式计算DPPH清除率(Y)。
Y=(1-Ct/C0)×100% ③
式中:C0 为反应体系中DPPH的起始质量浓度(mg·L－1 );
Ct 为40min后反应体系中DPPH 的质量浓度(mg·L－1 )。
16
4试验结果
：
组培铁皮石斛苗在捣碎情况下于90℃、料水比1:20、1小时条件下浸提，重复操作三次，％。
：
将组培铁皮石斛多糖和组培铁皮石斛苗用蒽酮-硫酸法测定多糖含量，组培铁皮石斛多糖和组培铁皮石斛苗中多糖的纯度分别是：％，％。由此可见，组培铁皮石斛多糖中可被检测到的多糖明显超过组培铁皮石斛苗。
17
FRAP法测定组培铁皮石斛的总抗氧化能力结果：
由下图可知，当样品加入量在50～300μg范围时，随着组培铁皮石斛多糖、组培铁皮石斛苗及维生素C加入量的增加，其总抗氧化的能力也随之增强。组培铁皮石斛苗的抗氧化能力最弱，组培石斛多糖抗氧化能力相对较强，而维生素 C的总抗氧化能力优于组培铁皮石斛苗。总体说来组培铁皮石斛多糖的总抗氧化 能力明显比组培铁皮石斛苗强得多。
18
：
依据Fenton反应体系建立的清除羟基自由基能力，其结果如下图所示。
由图可知，