文档介绍：蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷的含量测定
作者:汪旭,金向群,岳峻威,于翠翠【摘要】目的建立高效液相色谱法测定蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷含量的方法。方法采用十八烷基键合硅胶色谱柱(250 mm × mm,5 μm) ,以甲醇-%磷酸溶液(45∶55)为流动相, ml·min - 1 ,检测波长为280 nm。~ μg( r= 5),平均回收率( n=6) % (RSD= %)。结论该方法简单、迅速、可靠。
【关键词】高效液相色谱蒡芩慢咽滴丸黄芩苷
蒡芩慢咽滴丸是由蟾酥、黄芩、牛蒡子等3味药组成,其中蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍的干燥分泌物,含华蟾酥毒基和脂蟾毒配基。蒡芩慢咽滴丸具有解毒、止痛、开窍醒神之功效,用于痈疽疔疮、咽喉肿痛、中暑神昏、腹痛吐泻。黄芩为方中君药,黄芩苷是黄芩中主要成分,因此本实验采用高效液相色谱法对该制剂中黄芩苷进行含量测定,为其建立质量标准提供了依据。
1 仪器与试药
岛津SPD-10A 高效液相色谱仪;LC-10AT 紫外检测器;KQ-250D数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
对照品黄芩苷(批号:0736-200117)购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用),甲醇为色谱纯,其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果[1]
色谱条件
以迪马公司钻石C18 ( mm×250 mm,5 μm) 柱为色谱柱;甲醇-%磷酸溶液(45:55)为流动相,检测波长为280 nm;柱温为40℃。理论板数按黄芩苷(C21H18O11)峰计算应不低于2 500。
对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36 h的黄芩苷对照品适量,用甲醇制成每毫升含57μg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备
滴丸研碎,取约20 mg,精密称定,置25 ml量瓶中,精密加入甲醇20 ml,超声处理30 min,放冷,用甲醇定容至刻度,摇匀,精密移取1 ml于10 ml容量瓶中,甲醇定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜( μm)滤过,取续滤液,即得。
阴性对照溶液的制备
按照蒡芩慢咽滴丸的制备工艺制备不含黄芩的药粉,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。
阴性干扰实验
将配置好的对照品、供试品及阴性对照溶液按上述色谱条件分别进样10μl,结果表明,阴性样品在与黄芩苷对照品相应的位置上(约43 min)无干扰峰出现,说明处方中其它药味对测定结果无影响。以上3种溶液的色谱图见图1~3。
线性关系的考察
精密称取黄芩苷对照品适量,用甲醇制成每毫升含57 μg的溶液,分别精密吸取黄芩苷对照品溶液4,8,12,16,20 μl,分别注入液相色谱仪,测定。以进样量为横坐标,以峰面积值为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为Y=3 994 -13 868,r= 5,结果表明,~ μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系。
精密度考察
取同一供试品溶液,重复进样5次,每次10 μl, 计算相对标准偏差,% ,表明精密度良好。
稳定性实验