文档介绍：碱性蛋白与酸性蛋白的显示
目的要求
实验原理
以酸性氨基酸成分为主的蛋白质为酸性蛋白;以碱性氨基酸成分为主的蛋白质为碱性蛋白。细胞核内有组蛋白（碱性蛋白）及少量酸性蛋白，细胞质中主要有酸性蛋白，标本经三***醋酸处理抽碱性蛋白与酸性蛋白的显示
目的要求
实验原理
以酸性氨基酸成分为主的蛋白质为酸性蛋白;以碱性氨基酸成分为主的蛋白质为碱性蛋白。细胞核内有组蛋白（碱性蛋白）及少量酸性蛋白，细胞质中主要有酸性蛋白，标本经三***醋酸处理抽提掉核酸后，用不同pH值的快绿染液分别染色，使细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。
实验用品
：水浴锅，染色缸，载玻片，注射器等
：①70％乙醇溶液 ②5％三***醋酸溶液 ③％快绿 ④％Na2CO3溶液
⑤ HCL: ml（）加蒸馏水至100ml（ml）
⑥酸性蛋白染色液（）：％ HCL溶液混合而成
⑦碱性蛋白染色液（）：％％Na2CO3溶液混合而成。
：蟾蜍血涂片。
蟾蜍取血
常用捣髓法处死蟾蜍，即用解剖针捣毁其脑组织和脊髓。具体方法是，左手握住蟾蜍的身体和四肢，使其腹部贴着掌心，食指压住蟾蜍头部前端使其尽量腹屈。在头与躯干之间可触及一凹陷(即枕骨大孔所在处)，右手持解剖针直插入此凹陷约l～2mm，随即将针尖转向头侧插入颅腔捣毁脑组织。然后将解剖针抽回并转向尾侧刺入脊椎管内捣毁其脊髓。如此直至其四肢松软，呼吸消失为止。
以破坏脊髓法处死蟾蜍，将其腹面向上放人蜡盘中，剪开胸腔，打开心包。小心将心脏剪一小口，取心脏血一滴滴在干净载玻片一端，推片，按此法制备二张血涂片，室温晾干。
1取一滴血滴于玻片的一端
2以另一玻片以30-45度的角度匀速向前推片，中间不要停顿，不可反复涂片，动作要快以防止血液凝固。
3自然干燥后固定。
方法与步骤
min，入70%乙醇溶液中固定10min。
－90℃5％三***醋酸溶液15－20min。
％三***醋酸溶液漂洗后，蒸馏水洗3次（每次5min）。
（酸性蛋白染色液染色15min，碱性蛋白染色液染色45min）
，蒸馏水洗。
，二甲苯透明2min，树胶封片。
观察结果
酸性蛋白染色时，蟾蜍红细胞质内遍布绿色，细胞核内绿色稀少。
碱性蛋白染色时，蟾蜍红细胞核为绿色。
酸性蛋白与碱性蛋白的分布有何区别？
显示细胞内酸性蛋白
显示细胞核内碱性蛋白
实验一 碱裂解法抽提大肠杆菌质粒
1、实验目的 ：
学****与掌握碱裂解法抽提大肠杆菌质粒DNA的原理与方法
2、实验原理：
碱裂解法抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。
3、实验步骤及各步注意事项
ml大肠杆菌培养液12000rpm离心2min，弃上清，收集菌体。
注意点：上清为培养基，必须尽量倾倒干净，并在吸水纸上吸干，如有较多培养基残留可能会影响后续实验。
2. 加100µl的溶液 I，使菌体充分悬浮，室温静置3min。
注意点：必须充分混匀至看不见沉淀，可用移液器吹打或者用混匀器振荡。
3. 加入200µl溶液II，温和上下颠倒2-3次，溶液转变为澄清透明。
注意点：不可剧烈振荡。
4. 加入150µl溶液III，上下颠倒混匀数次，静置2-3min。
注意点：不可剧烈振荡，此时应出现白色沉淀。
5. 12000 rpm离心5min。
6. 取上清，加等体积（400µl）的酚/***仿/异戊醇，充分混匀，室温，12000rpm离心5min。
注意点：酚***仿有腐蚀性，盖严离心管盖，避免接触酚***仿，如接触立即用水冲洗。
7. 吸上层水相，再加1ml(倍体积）预冷的无水乙醇，混匀。
注意点：一定避免吸到中间沉淀及下层酚***仿。宁可损失一定上清。
8. 4℃，12000rpm离心10min。
9. 弃上清， ml 70％乙醇，4℃，12000 rpm离心5 min。
10. 弃上清，沉淀自然干燥10 min后，加20µl无菌水溶解。
注意点：弃上清时尽量将酒精倾倒干净，但注意不要将沉淀弃去。