文档介绍:: .
实验常用试剂、缓冲液的00mL 的去离子水,充分搅拌溶解。 免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在 160℃对其
3. 用浓盐酸调 pH 值至 。 进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯
4. 将溶液定容至 1L。 键的断裂或导致 RNA 和 DNA 的交联等。因此,苯酚的质量对 DNA、
5. 高温高压灭菌后,室温保存。 RNA 的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物
注意:应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值,因为 Tris 溶液的 学实验。
pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高 1℃,溶液的 pH 值大约 2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时
降低 个单位。 应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触
3、10×TE Buffer □组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA 过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
(pH ,,) □配制量 1L 3. 苯酚平衡:因为在酸性 pH 条件下 DNA 分配于有机相,因
□配置方法 1. 量取下列溶液,置于 1L 烧杯中。 此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其 pH 值达到 以上,苯酚
1 M Tris-HCl Buffer(,,) 100mL 平衡操作方法如下:
500 mM EDTA() 20mL ① 液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。从
2. 向烧杯中加入约 800mL 的去离子水,均匀混合。 冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在 68℃
3. 将溶液定至 1L 后,高温高压灭菌。 水浴中使苯酚充分溶解。
4. 室温保存。 ② 加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度 %。该化合物
4、3 M 醋酸钠 □组份浓度 3 M 醋酸钠 是一种还原剂、RNA 酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,
() □配制量 100mL 同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。
□配置方法 1. 称取 •3H2O 置于 100~200mL 烧杯 ③ 加入等体积的 1M Tris-HCl(),使用磁力搅拌