文档介绍：实验项目
血清胆固醇的测定-CHO
2学时
血清胆固醇浓度增高见于动脉粥样硬化,肾
病综合症,胆总管阻塞,黏液性水肿和糖尿病。
其他如肥大性骨关节炎、老年性白内障及牛皮
癣等血清胆固醇有增高。
血清胆固醇浓度降低常见于恶性贫血、溶血
性贫血及甲状腺功能亢进时,血清胆固醇降低,
其他如感染和营养不良等情况。
临床意义
【参考值】:~
一、实验目的
掌握:血清胆固醇测定的原理、操作方法和临床意义。
二、实验原理
2、
3、
,
用72-1型分光光度计分别测定标准管和测定管的吸光度值,
计算胆固醇的含量。
1、
三、实验器材与试剂
(1)试管 3支
(2)水浴箱 1台
(3)试管架 1个
(4)洗耳球 1个
(5)微量五档可调移液器 2支
(6)刻度吸量管(5ml) 1支
(7)72-1型分光光度计 1台
(一)实验器材
微量五档可调移液器
使用方法:
,以保证密封。
,润洗吸嘴和保持腔内外气压一致。
。
,将按钮按到第一停止点,然后把吸嘴浸入到液面下2~3mm,再缓慢放松按钮,使之复位,等待1~2秒后,从液体中取出,并避免碰撞任何物体。
,缓慢地把按钮按到第一停止点,等待1~2秒,再把按钮全部按下去,排尽液体后,吸液嘴应沿容器壁上滑动取出,再放松按钮,使之复位,即完成。
,打掉用过的吸液嘴,调回最大量程,仪器放置好保存。
72-1型分光光度计
工作原理
物质对光的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收波长。在一定波长下,某物质的溶液对光的吸收强弱(吸光度A)与溶液的浓度C和液层的厚度L的乘积成正比,即遵循朗伯-比尔定律:
A=K·C·L
(K为吸收系数,对同一物质来说为一常数)
使用方法:
:指针位于“0”。 ,打开比色皿暗箱盖,预热20分钟。
:夹毛面,擦干。 ,选择波长、调灵敏度。
、调100至稳定。 ,读数,记录,取样,清洗,关闭仪器。
1、血清(样本)
2、工作液
3、胆固醇标准液(标本): mmol/L
(二)实验试剂
四、实验内容和操作过程
1. 取2支干燥试管,分别标明测定管(T)、标准管(S)
然后按下表加入试剂:
加入物
测定管T 标准管S
血清(ml) 15
标准液(ml) 15
工作液(ml)