文档介绍：第四章 药物定量分析与分析方法验证
第二节 分析样品的前处理方法
第一节 定量分析方法
第三节 药品分析方法验证
练习与思考
基本要求
一、掌握定量分析方法及验证的效能指标。
二、熟悉定量分析方法的特点
三分逐一进行分析的方法，是分离分析混合物的最有力手段。
按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱
分类
按分离方法：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC
特点：高灵敏度、 高效能、高速度、应用广泛
四、色谱分析法
1. 对仪器一般要求
固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变
其他均可适当改变
色谱图20分钟内记录完毕
2. 系统适用性试验
色谱柱的理论板数：n = (tR /Wh/2)2
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2);
重复性：对照液连续进样5次，峰面积RSD％
拖尾因子：T = W/2d1 ～
（一）HPLC法
流动相
真空脱气机
四元泵
自动进样器
紫外检测器
荧光检测器
蒸发光散射检测器
液质联用仪
质谱检测器
流动相：对于以C18为固定相的反相色谱系统，常用甲醇-水，间或加以乙腈、缓冲液等为流动相，有机溶剂比例通常不低于5％
四元泵
自动进样器
色谱柱
填充剂常用：十八烷基硅烷键合硅胶
检测器
测定方法
1)内标法加校正因子测定供试品中主成分含量
对照液（R）： AR CR
峰面积 含量
内标液（S）： AS CS
供试液（X）： AX CX
f= ————
AS/CS
AR /CR
f= ————
A’S / C’S
Ax /Cx
Cx=f· ————
Ax
A’S / C’S
例
2)外标法测定供试品中主成分含量
对照液（R）： AR CR
供试液（X）： AX CX
CX CR
AX AR
——＝——
CX＝————
CR· AX
AR
要求：进样量准确、操作条件稳定
（二）GC法
1. 对GC仪器一般要求
载 气：氮气
色谱柱：填充柱或毛细管柱
填充柱：内径2～4mm，长1～10m，内装吸附剂
高分子多孔小球或涂渍固定液的载体
毛细管柱：内径～，长10～100m，
一般为空心柱，内壁或载体经涂渍或
交联固定液
检测器：氢火焰离子化检测器
色谱图：30分钟内记录完毕
2. 色谱适用性实验：同HPLC
：同HPLC
第四章
药物定量分析样品与分析方法验证
第一节定量分析样品的前处理
一、概述
研究对象：含金属或含卤素，硫，磷，硒等特殊元素药物分析前处理。
二、不经有机破坏的分析方法
三、经有机破坏的分析方法
一、概述
原料:不经特殊处理直接测定
原料:经有机破坏后测定
制剂:排除处方中干扰组分
药物
二、不经有机破坏的分析方法
（一）直接测定法
（二）经水解后测定法
（三）经还原分解后测定
二、不经有机破坏的分析方法
（一）直接测定法
葡萄糖酸钙
【含量测定】 取本品，精密称定，加水100ml，微热使溶解，加氢氧化钠试液 15ml与钙紫红素指示剂，用乙二胺四醋酸二钠滴定液() 滴定至溶液自紫 色转变为纯蓝色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液（） 的 。
二、不经有机破坏的分析方法
（一）直接测定法
葡萄糖酸锑钠
【含量测定】 取本品约，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水100ml 、盐酸15 ml与碘化钾试液10ml，密塞，振摇后，在暗处静置10分钟，用硫代硫酸钠滴定液( l/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白 试验校正。每1ml硫代硫酸钠滴定液() 的Sb。
二、不经有机破坏的分析方法
（二）经水