文档介绍：无菌工艺模拟试验指南〔无菌制剂〕
〔征求意见稿〕
国家食品药品监督管理总局
食品药品审核查验中心
二〇一六年十月
目录
1. 目的 1
应结合无菌生产工艺，尽量与实际无菌操作过程保持一致，以求试验结果真实反映生产过程的无菌保障水平。
无菌生产工艺的风险评估
无菌生产工艺的设计基于对产品特性、工艺技术和无菌保证措施的认知和经验的累积。设计模拟试验方案前应对无菌生产过程开展系统性风险评估，以充分识别无菌生产过程中潜在风险点。
模拟试验方案设计时，应重点考察和评估高风险的无菌操作过程。无菌生产工艺的暴露操作是影响最终产品无菌特性的重要环节，如设备〔或管道〕的无菌连接、无菌容器的转运和更换、灌装等关键操作。模拟试验方案设计应考察以上过程无菌保证措施的有效性。
证实无菌操作人员能满足无菌生产要求，是实施模拟试验的目的之一。进行模拟试验方案设计时，应结合工艺过程中的“开放〞环节，重点考察有人员参与的关键操作，评价人员无菌操作素养和防护措施的可靠性。
模拟介质的选择与评价
模拟介质的选择
应结合被模拟产品的特点以及模拟介质的可过滤性、澄清度、灭菌方式等选择适宜的模拟介质。不应选择明显具有抑菌性
的模拟介质，以确保模拟试验结果的可信度。通常可采用的模拟介质包括促进微生物生长的培养基和抚慰剂。
培养基的选择
胰酪大豆胨液体培养基〔TSB〕是一种广谱性培养基，特别对无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和真菌有良好的促生长效果，是无菌工艺模拟试验常用的培养基。
如果产品需充入惰性气体、储存在无氧条件，无菌操作在严格的厌氧环境中进行时〔%〕，应考虑采用厌氧培养基，如硫乙醇酸盐液体培养基〔FTM〕。在厌氧的无菌工艺环境监控中反复发现厌氧微生物或在产品无菌检查中发现厌氧微生物时，需评估增加厌氧培养基。
用于模拟抑菌性产品的培养基，需评估抑菌性产品残存对其促生长能力及模拟试验结果的影响。
6 对于包含动物来源成分的培养基，应考虑培养基引入外源性病毒污染的风险。如BSE〔可传染性海绵脑病〕/TSE〔疯牛病〕的风险。
培养基的配制
模拟试验的培养基应在控制区域进行准备。需注意培养基粉尘在环境中的扩散，以及设备外表的残留引发的微生物滋生。通常按照最终培养浓度3%的要求配制培养基。配制后的培养基应尽快灭菌或除菌过滤。
培养基在模拟试验前应恢复至室温，即用型无菌液体培养基储存条件和使用条件可遵循生产商要求。
培养基的除菌与灭菌
除菌过滤
在培养基选择阶段应考虑其过滤性。由于培养基的特性与药液有差异，培养基除菌过滤的滤器型号可与产品使用的过滤器不同。如因颗粒或生物负载较大等原因引起除菌过滤器的堵塞时，可增加预过滤步骤。
需考虑降低非无菌培养基中细菌和霉菌生长的风险，以防止微生物生长导致培养基过滤性能降低。针对以上情况应进行风险评估并采取合理应对措施。
湿热灭菌
采用在线灭菌或灭菌釜湿热灭菌方式时，应考虑防止受热不均匀或灭菌不充分现象。应对该灭菌方式进行风险评估和验证。
灭菌过程应遵循生产商推荐的灭菌时间和温度的建议，并对灭菌过程予以确认。确保灭菌后培养基的促生长能力，防止过度灭菌使培养基碳化造成其促生长性能的降低。为防止过度加热可采用湿热灭菌与除菌过滤联合使用的方式，但均应进行促生长能力试验。
辐照灭菌
使用辐照灭菌的培养基粉末，应在无菌环境下进行无菌配制等操作。辐照灭菌过程应经验证，并在产品质量报告中表达验证中所用的菌种和剂量等信息。
培养基促生长能力试验
应在无菌工艺模拟试验前及14天培养后按照现行中国药典方法对培养基进行促生长能力试验。
促生长能力试验使用的菌种包括：白色念珠菌〔CMCC98001〕、黑曲霉〔CMCC98003〕、枯草芽孢杆菌〔CMCC63501〕、金黄色葡萄球菌〔CMCC26003〕、铜绿假单胞菌〔CMCC10104〕和生孢梭菌〔CMCC64941〕等。除标准菌株之外，还应考虑参加环境和无菌检查中发现的典型微生物。促生长试验接种量应不大于100CFU，按照中国药典要求培养，以证明培养基能够支持微生物的生长。
其它模拟介质的选择及评价
其它模拟介质的选择
无菌粉末产品及特殊剂型产品，如悬浊液、软膏/乳膏/乳液/凝胶等，在无菌工艺模拟试验中会使用其它模拟介质，如抚慰剂、赋形剂等。应根据剂型特点、生产工艺及设备选择适当的模拟介质。
模拟介质的流动性应类似于被模拟产品，易于进行灌装/分装等工艺操作。模拟介质还应具有易于灭菌，无抑菌性，易溶解等特性。常用模拟介质有聚乙二醇、乳糖、甘露醇、***化钠、凡
士林等。模拟介质的