文档介绍：免疫检测分析技术 2012年5月
免疫测定的发展
(1)以抗原抗体的结合反应所致的沉淀或凝集现象判断结果的免疫测定技术,如单双扩,免疫电泳,玻片凝集,胶乳凝集,红细胞凝集试验等; (2)固相标记免疫测定技术,如放射免疫试验,酶免疫试验,荧光免疫试验等; (3)均相免疫测定技术,如酶放大免疫测定技术(EMIT),克隆酶供体免疫测定(CEDIA)等; (4)以单克隆抗体为基础的免疫测定技术的发展; (5)以基因工程技术为基础的免疫测定技术发展时期; (6)免疫测定的自动化; (7)生物芯片技术(免疫测定的集成化和微型化)。
如何区分不同的检测方法
以抗原抗体特异结合为基础,
以标记示踪物不同划分
放射免疫法
酶联免疫法
化学发光法
时间分辨法
免疫层析法
酶联免疫(ELISA ) 基础知识
免疫检测的基础知识
抗原 抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质,例如乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、甲胎蛋白(AFP)等。
免疫检测的基础知识
抗原 小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的,称为半抗原(hapten)。例如某些激素、药物等。抗原的反应性取决于抗原决定簇(antigenic determinant),或称为表位(epitope)。一个抗原分子可带有不同的决定簇,例如中可带有等决定簇。
抗体
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。
免疫检测的基础知识
酶联免疫法
可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。
在均相EIA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗体反应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。
酶联免疫法
均相EIA在临床检验中较少应用。非均相EIA需先进行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay),简称ELISA,
2017/7/29
L XUBIN