文档介绍：中学生物实验教学
综合实验3
【实验3-7】
观察DNA和RNA在细胞中的分布
【目的原理】
染色剂
染色颜色
主要存在部位
DNA
RNA
吡罗红
***绿
红色
绿中学生物实验教学
综合实验3
【实验3-7】
观察DNA和RNA在细胞中的分布
【目的原理】
染色剂
染色颜色
主要存在部位
DNA
RNA
吡罗红
***绿
红色
绿色
主要在细胞核，线粒体、叶绿体含少量
主要在细胞质
【实验准备】
人的口腔上皮细胞 大烧杯，小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片，铁架台，石棉网，火柴，酒精灯，吸水纸，显微镜
%的NaCl溶液，质量分数为8%的盐酸，吡罗红***绿染色剂，蒸馏水
【安全事项】
① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂
② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟
【实验方法步骤】
取口腔上皮细胞制片
水解
冲洗涂片
染色
观察
（8%HCl，能改变细胞膜的通透性，同时使DNA与蛋白质分离）
（蒸馏水）
（%的NaCl）
【方法步骤】
(一)取口腔上皮细胞制片
1、在洁净的载玻片上，%的NaCl溶液（维持口腔上皮细胞的正常形态）。
2、 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。
3、点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
(二)水解
1、在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。
2、在大烧杯中加入30℃温水。
3、将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
【方法步骤】
1、用低倍显微镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物象调节清晰。
2、换用高倍显微镜观察，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
(四)染色
1、用吸水纸吸去载玻片上的水分。
2、将吡罗红***绿染色剂滴2滴在载玻片上，染色5min。
3、吸去多余染色剂，盖上盖玻片。
(三)冲洗涂片
(五)观察
【方法步骤】
真核细胞的DNA主要分布于细胞核中。
线粒体、叶绿体内也含有少量的DNA。
RNA主要分布在细胞质中。
五、实验结论
【注意事项】
① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； ② 常用的观察材料有人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)
① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； ② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞
，切忌直接用水龙头冲洗。
【实验改进】
实验中是否要用盐酸处理以增大细胞膜通透性应根据所选材料而定。若使用处理, 一定要注意处理时间不宜过长, 以免进人细胞核内对DNA结构造成破坏, 并在处理后及时用NAHCO3溶液中和残留的盐酸, 从而避免残留细胞内的少量HCL改变染色剂发挥作用的pH值。
【实验思考】
2、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验中，没有用的试剂
％NaCl ％的HCl
C. 吡罗红、***绿染色剂
1、将用***绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在显微镜下观察，可以看到
，细胞质内呈现绿色
，细胞质内呈现红色
人口腔上皮细胞DNA、RNA分布
洋葱鳞片叶内表皮细胞DNA、RNA分布