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（二）、限制使用的农药
根据农业部第194号公告禁止氧乐果在甘蓝上使用，甲基异硫磷在果树上，涕灭威在苹果树上，克百威在柑桔树上，甲拌磷在柑桔树上，特丁硫磷在甘蔗上使用。
根据农业部第199号公告，从2002002、NY/T 448-2001）
一、原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
原理示意图：
以RP-410型农药残毒快速检测仪为例
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
二、试剂的配置及保存
（一）提取试剂
配制：使用时每袋提取试剂用1000ml蒸馏水溶解。
保存：固体及溶解后的提取试剂均在常温下保存。
（二）专用酶
配制：使用时每支酶粉用10ml提取试剂溶解。
保存：粉状的酶应储存在冷冻室内（约-18℃），用时用提取试剂溶解，溶解后的酶液分成2-4小瓶，暂时不用的储存在冷冻室内，用时解冻，用后的酶液储存在冷藏室（0-5℃）内，在一周内用
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
完，酶液反复解冻最多不能超多两次，否则会影响酶的活性。
（三）底物
配制：使用时每瓶底物用10ml提取试剂溶解。
保存：固体及溶解后的底物均应保存在冰箱的冷藏室内（0-5℃）。
（四）显色剂
配制：使用时每瓶显色剂用10ml提取试剂溶解。
保存：固体及溶解后的底物均应保存在冰箱的冷藏室内（0-5℃）。
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
三、农残速测实验室仪器配置
仪器名称 数量
1、RP-410农药残毒快速检测仪 1
2、台式恒温培养箱 1
3、微型样本混合器 1
4、电子天平（） 1
5、移液枪及其配套管嘴
可调移液枪 40-200ul 1
1-5ml 1
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
管嘴 40-200ul 100
1-5ml 25
96孔60型管嘴盒 1
6、其他小零件及玻璃仪器
定量加液器（20ml）*2、定时钟*2、取样器*2、提取瓶*20、玻璃棒*2、镊子*2、洗瓶*2、储液瓶（1000ml）*2、试管*20、平底小试管*20、量筒（500、20ml）各两个、烧杯（100、250、500、1000ml）各两个、橡胶垫*2、移液管（10、20m）各一支、容量瓶（1000ml）*1、大试管架*1、小试管架*1、标准口三角瓶*2、小试剂瓶*5，还有清洁刷、洗耳球、滤纸、蒸馏水瓶、记号笔、丝绸抹布等。
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
7、配套试剂
酶（7支）、底物（5瓶）、显色剂（瓶）、提取试剂（20包）可检测1125个样本。
8、配套设施
冰箱、电热蒸馏水器、大理石工作台、仪器柜、写字台、垃圾桶等。
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
四、检测范围及灵敏度
（一）蔬菜：叶菜、果菜、豆菜、瓜菜（除胡萝 卜、韭菜、茭白、蘑菇等）
（二）农药
1、有机磷类：
甲胺磷、对硫磷、氧化乐果、甲拌磷、久效磷、敌敌畏、杀扑磷等（-5㎎/㎏）
甲基对硫磷、水胺硫磷、甲基异柳磷、毒死蜱、乐果等（灵敏度8-10 ㎎/㎏ ）
酶抑制法（GB/T -2002、NY/T 448-2001）
2、氨基甲酸酯类：
克百威、涕灭威、灭多威、丙硫克百威、丁硫克百威、抗蚜威、仲丁威、苏灭威、残杀威、西维因、叶蝉散（- ㎎/㎏ ）。
注：葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可