文档介绍：微生物发酵产酶PPT课件
※收集、筛选菌种
⑴收集土样
⑵初筛：单菌落培养，用透明圈法选出产
目的酶的微生物（使用鉴定培养基微生物发酵产酶PPT课件
※收集、筛选菌种
⑴收集土样
⑵初筛：单菌落培养，用透明圈法选出产
目的酶的微生物（使用鉴定培养基）
⑶复筛：单菌落培养，选出符合优良菌种
要求的菌落（使用选择培养基）
单菌落培养
优良菌种要求与常用菌种
透明圈法
※菌种保藏
菌种保藏方法：
(1)斜面培养法
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
※细胞活化
保藏的菌种通常以芽孢形式存在（保藏时
营养缺乏），需放入营养充足的营养环境中
活化：芽孢→营养细胞
※扩大培养
：根据菌种特点配制培养基，使菌种
大量繁殖用于发酵
：种子罐培养；实验室培养
（工业生产） （实验室）
：使菌种大量繁殖，用于发酵
※培养基配制：碳源、氮源、生长因子、无
机盐、水
※C／N：碳源：糖→加碳源加C/N→酸性→利于菌种
保存（作保存培养基）
氮源：有机、无机→加氮源减C/N→碱性→
利于酶制剂生产（产酶需N元素）
※ 产酶微生物
：繁殖力强(繁殖周期短)
产酶稳定，产酶能力强
安全(不用病菌)
利于发酵管理(易于发酵)
：略
※单菌落培养法：稀释涂平板，长单菌落，易
于分离
※透明圈法：例如:明胶作培养基可鉴别出产蛋白酶
的菌落(明胶是蛋白质,蛋白酶可分解明胶)
CaCO3作培养基可鉴别出产酸菌落(产生
的酸可分解CaCO3,形成透明圈)
※发酵管理
、PH：最适生长温度、PH与最适产酶温度、PH不同,要实时监控、
调节温度、PH 温度：0-10oC;PH:酶活力范围内，
防酶变性
※调PH方法：CaCO3（备用碱）
磷酸缓冲液：维持PH稳定
调C/N：只工业上适用，C/N↑→酸， C/N↓→碱
：(1)搅拌，使大气泡变为很多小气
泡
(2)加大通入氧气量
：⑴产生：搅拌发酵液增大溶氧量
⑵危害：①阻碍CO2排出，使PH减
小，使发酵液变酸，影
响微生物生长、产酶
②气泡过多会使菌液漫
出，造成菌种污染
⑶消除方法：机械消泡、化学试剂
消泡、表面活性剂消
泡
⑴开始：低
⑵后来：高
①加诱导物
②减阻遏物
③转基因（获得产酶能力强的微生物去产酶）
④加表面活性剂
⑤加产酶促进剂
微生物生长与产酶模式
※微生物生长与产酶模式
微生物生长模式：调整期、对数期、平衡期、衰亡期
产酶模式：：调整期始产酶，平衡期始停产
：对数期始产酶，平衡期始停产
：平衡期始产酶，衰退期始停产
：调整期始产酶，衰退期始停产
※提高产酶能力的方法（变为延续合成型）
（中期、滞后）：有营养物阻遏效应，减少营
养阻遏物浓度
（同步、中期）：mRNA不稳水解，降温使mRNA稳