文档介绍：用正交法测定几种因素对酶活力的影响
实验目的：
1 掌握正交法的原理
2 用正交法测定几种因素对于酶活力的影响
实验原理：
酶反应受到多种因素的影响，如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和抑制剂等 都能影响酶的反应速度。这种多
2
4
9
3
5
7
0
0・5
pH7
pH8
pH9
pH8
pH9
pH7
pH9
pH8
pH7
pH8
37°C 预温 5min
50C预温 5min
60C预温 5min
15%TCA
2ml 600s
0・5
37C 反应 10min
50C反应 10min
60C反应 10min
按一般方法,如对三个因素三个水平的各种搭配都要考虑,共需做 33=27 此实验，而 用正交表只需做9次试验•选用L9表（L是正交表的代号）,L右下角的数字表示试验次 数）。60
l9表有两个特性：
（1） .每一列中“1” “2” “3”这三个数字都出现三次，即出现次数相同。
（2） 每两列的横行组成的“数对”共有九个，九种不同的数对（1，1）、（1，2）、（1，3）、 （2， 1）、（2， 2）、（2， 3）、（3， 1）、（3， 2）、（3、3）各出现一次。
在每一列中各个不同的数字出现的次数相同；每两列的横行组成的各种不同的“数对”出 现的次数也都相同，这两点就是正交表的特点，它保证了用正交表安排的试验计划的均衡搭 配的。因此，分析数据比较方便，结果比较可靠。
2. 实验安排
将本实验的四个因素依次放在L9的第1、2、3列，再将各列的水平数用该列因素相应 水平写出来，就得到下面的实验安排表。
正交法测定集中因素对酶活力的影响——实验安排表
： 试验号
试剂/ml
1
4
7
2
5
8
3
6
9
HO/ml
2 2
5
巴比妥钠-盐酸缓冲液/ml
pH5
pH7
pH9
pH7
pH9
pH5
pH9
pH5
pH7
37oC 预温 5min
50oC 预温 5min
60oC 预温 5min
酶液/ml
37oC 反应 10min
50oC 反应 10min
60oC 反应 10min
mol/L 的硫酸/ml
5毫升终止反应
表中试验号共9个，表示要做9次试验，每次试验的条件如每一纵行所示。如做第一
试验时 , [E]是 ml,温度 37C pH 为 5,其余类推。
另取第10支试管，作非酶对照， H2O2 5ml,， mol/L 的硫酸5 ml,摇匀放置10分钟后加入酶液