文档介绍：HPV临床常用检测方法
HPV临床常用检测方法
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HPV临床常用检测方法
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因为HPV不可以在体外细胞培育,故不可以用简易的血清血检测进行HPV的诊疗和分型。临床上
用于检测HPV的方法包含细胞学方法、免疫组化、原HPV临床常用检测方法
HPV临床常用检测方法
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因为HPV不可以在体外细胞培育,故不可以用简易的血清血检测进行HPV的诊疗和分型。临床上
用于检测HPV的方法包含细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和PCR
等,此中以PCR方法的敏感性最高,是当前应用最多
感染的HPV型别、含量、连续时间决定病变的发展与预后,是进行HPV检测的主要内容。
当前主假如经过应用分子生物学方法进行HPVDNA的检测。
1、现有的HPV实验室主要检测手段:
①聚合酶链反响(PCR,PolymeraseChainReaction):扩增位于两段已知序列之间的
DN***断的方法。该法有较高的敏感度,可进行HPV分型,弊端是对实验室环境要求较高,容
易发生样本间的交错污染,进而致使假阳性率高。
②核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度,还能够进行HPVDNA的分型,各样核酸杂交检测方法有必定的
优弊端。
核酸印迹原位杂交
合用于HPV分型和HPVDNA分子量判定,固然敏捷度高,但因操作复杂,需要新鲜组织标
本,不便在临床上大规模使用。B斑点印迹
其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,固然经济适用,但实验过程存在有放射
性污染,是环保所不可以小看的问题。
C原位杂交(insituhybridization,一种核酸杂交技术,可用来测定基因或特定核
苷酸序列在核酸分子的所在部位,检测重组体DNA)经过非放射性探针对白腊组织进行检
测,能作定位检测,假阳性率低,但敏捷度不高,大大降低了临床使用价值。
D杂交捕捉法(HybridCapture)
杂交捕捉试验是利用化学发光抗衡体捕捉的信号加以放大。第一使DNA双链开释并分解
成为能够杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针联合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将
RNA-DNA杂合体捕捉,偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体联合,碱性磷酸酶使酶
底物发光,依据光的强弱可确立碱性磷酸酶的含量,进而确立RNA-DNA杂合体的含量。能检测
种高危型HPV,包含HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。
各样检测方法的比较
各样检测方法的比较
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HPV临床常用检测方法
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方法学
敏捷度
特异性
技术特色
细胞学(Cytology
)
低
低
操作简单,成本较低,正确度较差
斑点印迹(Dotblot
)
中
中
有必定放射性
核酸印迹原位杂交(southern
blothybridization
)
高
高
标准、麻烦,不宜大规模使用
原位杂交(InSitu
高
中
蜡块组织包埋内检测HPV
hybridization)
杂交捕捉(HC、HC2)
无放射性,易使用,高、低危型间有交错反
高
中
应,且