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1、 SUMO:其大小为12KD,他与泛素蛋白分子同源性为18%,所以命名为小泛素蛋白分子,简称SUMO。SUMOE1是激活酶,是一个二聚体蛋白复合物。SUMOE2是结合酶。SUMOE3是连接酶,目前鉴定出三类该连接酶:PIAS,"Hl
1、 SUMO:其大小为12KD,他与泛素蛋白分子同源性为18%,所以命名为小泛素蛋白分子,简称SUMO。SUMOE1是激活酶,是一个二聚体蛋白复合物。SUMOE2是结合酶。SUMOE3是连接酶,目前鉴定出三类该连接酶:PIAS,RanBP2和PC2。其中PIAS在酵母中发现,相关蛋白Siz1和Siz2参与了酵母中SUMO化的过程。
2、 根系相关的参数:
根形态参数:总根长、比根长、根表面积
根生理参数:根际pH、酸性磷酸酶活性、有机酸分泌量
生物量:总干重、苗干重、根干重、根苗比
3、根系分泌物的收集方法:根系从土壤中取出后,轻轻抖动除去松散的土壤(土体土),紧密粘附在根系的土壤则为根际土壤。,分装根际土壤溶液,用以检测根际pH,酸性磷酸酶和有机酸含量。有机酸分装提取液中需要加入微生物抑制剂Micropur
(SicheresTrinkwasser,Germany,-1)和三滴浓磷酸以抑制微生物对分泌物的分解,根际pH和酸性磷酸酶分装提取液则直接冷冻保存保存在20oC冰箱中。
4、 根际pH,酸性磷酸酶活性和有机酸含量的确定:
(1)根际pH:由于土壤pH依赖于根际土壤质量,而根际土壤质量在植物种类和磷处理之间也存在较大的差异,因此必须对土壤提取液的pH进行修正,以消除土壤质量所产生的影响。根据Lietal.(2008b)所描述的方法,以原始土壤为基础,通过测定不同水土比分别为1:,1:5,1:10,1:20,1:40,1:50时的土壤pH,分别除以水土比为1:5时的土壤pH,获得pH比率任)。根据pH比率与土壤质量的对数关系,建立方程y=-(x)+(R2=,P<),其中y为修正后的pH与根际pH的比值,x为土壤质量(g)o根系分泌物提取液解冻后,用pH计(SartoriusPB-21,Germany)直接测定根际土壤提取液的
pH值,测量所得的根际土壤提取液pH值用上述所建立的方程修正为水土5:1时的pH。修正后的pH值可以认为是根际土壤的pH值。土体的pH值直接按水土比1:5的比例,用去离子水提取30min,用pH计测量提取液的pH值。
(2)根际酸性磷酸酶活性:根际酸性磷酸酶活性基于Neumann(2006)所提出的研究方法确定。根际土壤提取液解冻后,,
对硝基苯磷酸二钠(pNPP),在25°C条件下暗培养1h后,。土壤悬浊液在4000gmin-1条件下离心10min,按一定比例稀释后,405nm波长下测定吸光值。根据标准曲线确定土壤水解释放的对硝基酚含量。酸性磷酸酶表述为每小时
每克根际土水解产生的对硝基酚的毫克数(mgp-nitrophenolh-1g-1干土)。
对根分泌的酸性磷酸酶的定量检测主要基于酸性磷酸酶对底物