文档介绍：家兔急性弥漫性血管内凝血(DIC)
摘要目的:掌握动物实验常用技术,学****复制弥漫性血管内凝血(DIC)动物模型,通过血小板计数、纤维蛋白原含量的测定、血浆鱼精蛋白副凝试验(3P试验)等血液学指标的实验结果,进一步探讨DIC的发病机制。方法:通过给家兔颈静脉缓慢注射4%兔脑粉溶液制作DIC动物模型,使用PcLab数据采集系统采集家兔DIC前后的动脉压、静脉压和脉压等生理指标。DIC前后分时段采血进行血小板计数、纤维蛋白原含量测定和3P试验等血液学指标的测定。结果:通过注射4%兔脑粉溶液制作DIC模型后,家兔的血压、呼吸等生理指标明显下降,血小板的数量和纤维蛋白原含量等血液学指标逐渐降低,3P试验由阴性转化为阳性。
关键词:家兔DIC模型;血小板计数;纤维蛋白原含量测定;3P试验
前言:DIC是在某些严重疾病基础上,由特定诱因引发的复杂病理过程。致病因子引起人体凝血系统激活、血小板活化、纤维蛋白沉积,导致弥散性血管内微血栓形成;继之消耗性降低多种凝血因子和血小板;在凝血系统激活的同时,纤溶系统亦可激活,或因凝血启动而致纤溶激活,导致纤溶亢进。临床上多以出血、休克、多器官功能衰竭(MODS)以及血管病性溶血等为突出表现[1]。
实验用兔脑浸液经耳缘静脉注入家兔体内,能复制成家兔实验性DIC,将在动物身上获得的资料和结果与人类疾病表现进行比较与分析,从而阐明DIC的发生机理, 揭示疾病发生发展的规律,为临床疾病诊断和治疗提供理论依据[2]。我们小组通过静注兔脑粉溶液复制DIC动物模型,并在DIC前后分时段采血进行血小板计数、纤维蛋白原含量测定和3P试验等血液学指标的测定,以观察DIC前后家兔的血液学变化,从而进一步了解DIC的发病机制。
实验材料:
:家兔1只,。
:粗剪刀、止血钳8把、组织剪、眼科剪、眼科颞(弯、直各1把)、组织镊、手术线2条、培养皿、50ml注射器、25ml注射器、10ml注射器、5ml注射器、EP管6个、血细胞计数版、试管8个、注射针头2个、加样枪、枪头若干。
:20%乌拉坦、%肝素、4%兔脑粉、37℃生理盐水、37℃饱和***化钠溶液、1%硫酸鱼精蛋白、血小板稀释液。
:PcLab计算机生物信号采集处理系统、压力换能器、动静脉插管、三通管、37℃水浴箱、离心机、分光光度仪。
实验步骤:
、称重、麻醉与固定:捉拿家兔,称量体重,%乌拉坦(5ml/kg)由耳缘静脉缓慢注射,注射期间注意观察呼吸频率、肌张力、疼痛反射和角膜发射的变化,待家兔四肢呼吸平稳,肌肉松弛,疼痛反射和角膜反射消失后,将其仰面固定于手术台上后颈部剪毛备皮。
:沿甲状软骨下正中剪开皮肤,分离左侧颈动脉,经左侧颈动脉插入动脉管,观察并通过PcLab计算机生物信号采集处理系统记录家兔此时的血压和呼吸。
:通过动脉插管取4ml动脉血(动脉血①)置于有肝素的注射器中,以测定3P试验、纤维蛋白原、血小板计数并记录。
:分离右侧颈静脉,经右侧颈静脉插入静脉管,以备补液和复制DIC模型。
:%兔脑粉溶液(2ml/kg)与16ml生理盐水混匀,沿家兔的耳缘静脉