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真菌检测方法.docx

上传人:guoxiachuanyue002 2022/9/10 文件大小:28 KB

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文档介绍

文档介绍:分离培养:无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中,置37CM温箱中培养24小时,长成绒毛样菌丝,未见其它细菌生长。经48小时培养长成白色菌落。72小时菌落呈纽扣状,由中心向外周逐渐变深,转变成灰白色、灰绿色。取培养物镜检可见人量球形的分生抱子。分离培养:无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中,置37CM温箱中培养24小时,长成绒毛样菌丝,未见其它细菌生长。经48小时培养长成白色菌落。72小时菌落呈纽扣状,由中心向外周逐渐变深,转变成灰白色、灰绿色。取培养物镜检可见人量球形的分生抱子。
通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包括孫菌,每菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成,按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包扌舌霉菌,霉菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成,按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌,包括皮肤癣菌、范子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。而霉菌多为细胞真菌的一种,也为深部感染真菌,包扌舌烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等,常发生于免疫力低下的患者,引起全身播散性感然,影响预后。
培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在口常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲密、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,***孫素50mg,蒸馆水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白腺5gzKH2PO41gzMgSO4-,***,%二***硝基苯***,琼脂15g,)上则正常生长,抱子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的密菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食■品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DG1&
由于霉菌中很多种类不会产生有毒的孫菌***,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌***却危害较人,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白M10g,,%二***硝基苯***,琼脂15g,)用于分离黄曲霉***产生菌高污染率的食品。产黄曲霉***的菌株黄曲孫和寄生曲廊在AFPA上30°C培养2-3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选