文档介绍：白喉杆菌
结核杆菌
芽胞杆菌
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1
实验目的:
通过感性认识,加深对白喉杆菌、结核杆菌、芽胞杆菌生物学性状的印象和记忆。
通过实验掌握两种染色法。
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白喉杆菌实验内容:
(一)观察白喉杆菌的形态(阿尔伯
白喉杆菌
结核杆菌
芽胞杆菌
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1
实验目的:
通过感性认识,加深对白喉杆菌、结核杆菌、芽胞杆菌生物学性状的印象和记忆。
通过实验掌握两种染色法。
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2
白喉杆菌实验内容:
(一)观察白喉杆菌的形态(阿尔伯染色)
(二)观察白喉杆菌在吕氏血清斜面上和亚碲酸钾培养基上的生长情况(示教)
(三)观察白喉杆菌毒力试验(示教)
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实验材料:
阿尔伯(Albert)染色
材料:
接种环、酒精灯、生理盐水
玻片 1片/人
白喉杆菌的吕氏血清斜面培养物1支/2人
阿尔伯染色液1套/2人
染色缸,染色架,胶瓶1套/2人
吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸
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(一)阿尔伯(Albert)染色实验方法:
步骤
涂片→
干燥固定→
阿尔伯“甲液”染7-10分钟后水洗→
阿尔伯“乙液”染1分钟后水洗
(将观察结果绘图)
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(二)观察白喉杆菌的生长情况(示教)
亚碲酸钾培养基
吕氏血清斜面
亚碲酸钾培养基
吕氏血清斜面
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(三)观察白喉杆菌毒力试验(示教)
平板毒力试验(Elek平碟法)
白喉外***
原理:***抗***中和(双向琼脂扩散)
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白喉杆菌毒力试验(Elek平碟法)
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二、结核杆菌
(一)抗酸染色法(复染法)(二)观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况(示教)
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抗酸染色法原理
抗酸性菌体内含脂类物质较多,如结核杆菌(脂质占菌体干重的20~40%,占胞壁干重的60%)体内含有分枝菌酸(脂类),此物质具有抗酸的性质。染色时,它与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性酒精的脱色作用,同时脂类又不易透过细胞膜,不能被脱色,因此抗酸菌能保持复红的颜色。相反,非抗酸性菌体内含脂类少,易被酸性酒精脱色,脱色时又易从细胞膜渗出而脱掉,最后被复染成蓝色。
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(一)抗酸染色法(复染法)
步骤:
取痰涂片1片→
固定→
石炭酸复红染7—10分钟后水洗→
3%盐酸酒精脱色3—5秒,重复3次,然后水洗→
碱性美蓝复染2分钟后水洗→
自干或用吸水纸吸干,然后在油镜下观察结核杆菌的形态、排列及染***。
(将观察结果绘图)
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(二)观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况(示教)
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三、芽胞杆菌(G+)
(一)观察炭疽杆菌的形态和菌落特点(示教)
(二)观察产气荚膜杆菌的形态和生长特点(示教)
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(一)观察炭疽杆菌的形态和菌落特点(示教)
形态:
致病菌中最大的细菌
菌体粗大,两端平截或凹陷。
竹节状排列
革兰氏染色阳性
芽胞
荚膜
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炭疽杆菌
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(二)观察产气荚膜杆菌的形态和生长特点(示教)
形态
(复****br/>生长特点
汹涌发酵现象
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汹涌发酵现象
在牛乳培养基中分解乳糖,产酸使酪蛋白凝固;产生大量气体,将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状,甚至冲开管口棉塞,气势汹猛。
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1、显微镜(油镜)的使用和保护方法
(1)提供一张细菌玻片标本,要求能正确使用油镜观察到细菌的基本形态;
(2)掌握显微镜(油镜)的保护方法
2、血清对倍稀释法
(1)用生理盐水将血清进行对倍稀释,终浓度达到1/2,1/4,1/8三个稀释度;
(2)掌握血清对倍稀释的原理和方法,能正确使用刻度吸管。
3、玻片凝集试验
(1)要求用伤寒诊断血清,采用玻片凝集试验的方法检测待检细菌是否为伤寒杆菌;
(2)要求操作方法、步骤正确,能准确判断结果;
(3)无菌操作正确。
4、革兰染色法
(1)口试回答细菌涂片的制作方法;
(2)将一张已涂好的细菌玻片进行革兰氏染色;
(3)要求染色步骤及各项染色时间正确,操作熟练。
5、细菌划线分离培养技术
(1)将细菌分区划线到普通琼脂平碟上
(2)要求划线分区正确,接种划线手法正确、熟练
(3)无菌操作正确
6、液体培养基的细菌接种方法(无菌操作)
(1)将菌种接种到液体培养基内
(2)要求各环节无菌操作正确
7、细菌在培养基中生长情况及细菌特殊结构的观察
(1)正确描述固体培养基的菌落、菌苔
(2)正确描述半固体、液体培养基中的细菌生长情况
(3)正确观察出镜下细菌的特殊结构
8、抗酸染色
(1)正确回答抗酸染色的各个步骤(包括用加热法或不加热法、初染时间)
(2)操作技术手法正确熟练
(3