文档介绍：用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察
用猪蓝耳病弱毒疫苗治疗普通型猪蓝耳病效果观察
猪蓝耳病是一种发病率和死亡率高、传播快、主要侵害猪的繁殖和呼吸系统的病毒性传染病。主要表现为母猪繁殖障碍、仔猪断奶前高死亡率、育成猪的呼吸道疾病三大症状。多表现为高热(41℃以上)、精神沉郁、厌食、呼吸困难,耳朵、乳头、***、腹部、尾部发绀,以耳尖最为常见。怀孕母猪流产或早产,.、死胎和病弱仔猪,死产率可达80%~100%。仔猪特别是乳仔猪死亡率很高,可达80%以上。大多数新生仔猪出现呼吸困难(腹式呼吸)、肌肉震颤、后躯麻痹、共济失调、打喷嚏、嗜睡、精神沉郁、食欲不振等症状。育肥猪体温可升高至41℃左右,食欲明显减少或废绝,多数全身发红,呼吸加快,咳嗽明显,个别病猪流少量黏性鼻液[1]。该病大多混合感染猪瘟(HCV)、猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病病毒(ADV)、猪圆环病毒2型(PCV-II)和猪胸膜肺炎(APP)、猪链球菌、副猪嗜血杆菌(HP)、多杀性巴氏杆菌(PM)、猪支原体肺炎(MH)、弓形体、附红细胞体、猪霍乱沙门氏菌(SC)等,无继发感染的病猪死亡率较低。
2010年5月以来,在宜昌市先后对8起普通型猪蓝耳病疫情进行了治疗,共治疗1 496头,治愈1 319头,取得了很好的效果。现将治疗情况总结如下。
1材料与方法
2010年5月以来,先后对宜昌市出现有猪蓝耳病临床症状的8例病猪血样进行了PCR诊断。
猪全血:疑似症状猪全血共24份(每例3份)。
引物:参照方六荣[2]、李彬等[3]的方法设计一对特异性引物。上游引物(Nsp2F)序列为5′--3′,下游引物(Nsp2R)序列为5′-GCTGAGTATTTTGGGCG-3′。PRRSV变异株和经典毒株预期扩增产物长度分别为418bp和508bp。
主要试剂:RNA提取试剂盒购自美国OMEGA公司;RT-PCR试剂盒购自大连宝生物公司;低分子量蛋白质Marker、琼脂糖购自OXOID公司。
病毒总RNA的提取:采集的全血分离后收集上清,RNA病毒的抽提按试剂盒说明书进行。
反转录反应:按TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver 。反转录产物直接用于PCR反应模板或-20℃保存。
PCR反应:反转录产物10 μL,5PCR Buffer μL, μL(20 μmol/L),TaKaRa Ex Taq HS μL(5 U/μL),用灭菌双蒸水补充总体积至50 μL。PCR 反应条件为:94 ℃变性5 min;进入PCR循环,94 ℃ 1 min,57 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,35次循环后,72 ℃延伸10 min,4 ℃保存。
PCR产物电泳检测:PCR产物在1%琼脂糖凝胶上进行电泳,当溴酚蓝电泳至适当位置,在长波紫外灯/凝胶成像系统下观察或拍照。
(JXA1-R株)。