文档介绍：中国农业科学院学位论文籈溯源用标准蛋白在大肠杆菌中的表达与制备业:生;洌拦掣彩污雀物学养密级:论文编号:硕士研究生:刘树鹏指导教师:刘德虎研究员申请学位类别:理学硕士专研究方向:蛋白的表达与纯化培单位:生物技术研究所研究生院提交日期:月甤籈
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猫侧‘\\\\、答辩委员会签名表博导∥博导溯源用标准蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化刘树鹏研究方向刘德虎生物技术研究所职称位论文题目生物化学与植物基因工论艾作者专业分子生物学程,产教师培养单位芯克硕姓名单签名导师博导盛博导口博导留博导盯戴荣继教授博导日北京理工生命科学院研究中国农业科学院研究闫艳春博导回作物遗传育,痢S河北农业大学中科院微生物研究所微生物中国农业大学生物学院沈世华中科院植物研究所硕导口中国农大农学与生物富幔,萨厶一;技术学院中录厥孙国清论℃答辩时認地点地点:作物所重大工程楼沂眆:砰人’生院坂种云雌缸肖兴国符张锐齐俊生贝‘:叭.;口筘舟琿‘‘,.:
论文作者签名:套魄研究生签名:五卜帆辍卧日时吣,/年/月印日独创性声明关于论文使用授权的声明C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
摘要┐,,为芳香族氨基酸的合成提供前体物质,该酶广泛地存在于微生物及高等植物体内。由于浅菁敛莞熟⒌陌斜昝福陨秆「呖草甘膦禄虻难芯抗ぷ鞅还惴赫箍#醋愿┡└⒈硐殖龇浅8叩目剐裕撕蟾没虮还惴旱赜τ糜诙嘀肿魑锏淖;蜓究中,截止年,包括大豆、玉米、油菜、棉花、甜菜和苜蓿等,播种面积近万公顷的转基因作物中都含有该抗除草剂基因。面对大量含有;虻淖魑锘蚴称方谖夜建立科学的检测方法尤为迫切。虽然现在市场上有多种用于转基因蛋白质测定的试剂盒,但不同厂商采用不同的工艺表达以及方法确定参考物质的量值,无法溯源到上一级的计量标准,造成测定结果不准确和缺乏可比性,由此给生物安全监管带来隐患,并产生一系列法律、贸易等经济和为获得稳定来源并且具有高纯度的鞍祝狙芯渴紫裙菇薈的细菌表达载体,并首次实现此基因在大肠杆菌菌种中的表达。超声波破碎菌体后,发现该重组蛋白并未以包涵体形式存在于细胞质中,而是以可溶的形式存在于细胞破碎上清液中,为下游的蛋白纯化工作带来极大的便利,通过二步镍柱亲和层析后,,通过组培的方法,获得了株检测为阳性的烟草苗。经过橹暄滩萦忻飨缘表达。以提纯的鞍鬃鑫1曜嘉镏剩∈统刹煌呐ǘ龋晒Φ幕嬷屏吮曜计返鞍的标准吸光曲线。取三株较高表达的烟草为检测对象,利用绘制的标准曲线,能够检测到三株烟草外源蛋白的表达水平。利用上述蛋白表达和纯化体系,已可规模化和标准化生产刈榈鞍祝⒓笆碧供给北京理工大学和国家计量研究院等合作单位,以便开展更进一步的研究工作。关键字:蟪Ω司泶铮鞍状炕珽社会问题。蓿篍
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录目第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯转基因作物概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.;蜃魑镏种裁婊中龀ぁ.;蜃魑镏种补以龆唷.;蜃魑镏种驳娜丝谠龆唷.;蜃魑镌诜⒄怪泄摇.;蜃魑锏闹掷唷.;蜃魑锏男宰础.;蜃魑锏恼雇瓻转基因作物的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.姆⑾钟牍δ堋瓻酶抗草甘膦的作用机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯瓻在植物细胞中的定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.;⒆;蜃魑锏难芯俊转基因作物的检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;蜃魑锉泶锼返募觳狻第二章瓻标准蛋白的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯