文档介绍：中国农业科学院学位论文脱几窝撞《局泄餍兄晟镅特性相关研究博士研究生:指导教师:孔宪刚研究员申请学位类别:专业:研究方动物病毒分子生物学及分子培养单位:中国农业科学院研究生院哈尔滨兽医研究所密级:论文编号:刘晓丽农学博士预防兽医学向:免疫学提交日期月
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\‘\您弛铴浍炊/劲一砖庑序羞分锄移厶中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目论文作者专业研究方向指导教师孔宪刚研究员培养单位芯克⒅行哈尔滨兽医研究所姓名职称硕单位签名脱几窝撞《局泄餍兄晟镅匦韵喙匮芯刘晓丽预防兽医学评博导口人辩李庆章教授东北农业大学基础兽医学翁长江研究员预防兽医学。中科院昆明动物研究委军事医学科学院华育平东北林业大学硕导口涂长春会议记录厥论文答辩时间地点年跏抟窖芯克醣ǜ嫣阅放主席博导■博导一于力张华堂所扈荣良王永强动物病毒分子生物学及分子免疫学贝口
研究生签名:剖砻论文作者签名:安至关于论文使用授权的声明独创性声明月加日时间:≯。,,年‘/C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵时间:如/本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间妒本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。年彳月导师签名石月,名日
为研究匝嫉闹虏⌒裕狙芯垦≡窕駻型病毒羌魑4矶局甓传代,成功将/视ε摺7⑾值病毒能够稳定地在鸡胚中繁殖并致摘要本研究以餍胁⊙У鞑槲G腥氲悖占筒杉曛泄饕5难嫉厍代鸭胚就会出现明显病变,表现为全身出血、发育受阻、胚死亡等病理变化,且鸭胚尿囊液对鸡为迸一步了解中国姆肿犹卣鳌⒒蛞糯莼卣饕约安煌蛐筒《镜姆植迹雏鸭进行攻毒试验。结果显示该毒株对嫉闹滤缆饰ィザ后部分雏鸭开始死亡,鸭肝炎病毒珼且鹧疾《拘愿窝病原,该病毒可分为鲅G逍停即和个血清型之间无血清学交叉反应,其中治狝、虲龌蛐停珼在世界范围内流行和分布,是严重危害养鸭业的重要病原,造成了巨大的经济损失。包括山东、广东、北京、福建、江苏和云南等省市喔鲅吵⊙嫉母卧嗖×希ü±肀浠岷匣鉴定等方法,分离到株《尽4蠖嗍鼶病毒阳性病料接种鸭胚后,第一代或第二外周血红细胞没有凝集活性,表明尿囊液中不含能够凝集鸡血红细胞的禽正粘病毒、副粘病毒等。研究通过对戏⒈淼钠渌局昊蜃樾蛄薪斜榷裕诒J厍杓对引物,同时应用死┰黾际鹾蚏姆椒ɑ竦昧苏闐病毒的全部基因组序列。结果发现,株病毒的基因组全长在到之间。由于《疚P病毒科中未分类病毒,因此本研究首先利用全基因组遗传发育分析将分离到的株病毒与小《究破渌个病毒属的株病毒进行比较,发现本研究分离到的肫渌病毒具有较远的遗传关系,提示Ω没治P科内的一个新属。在此基础上,本研究将株《居株慰级局杲辛讼低撤⒂冉希砻鱀可分为和龌蛐停胍报道结果一致。本研究分离到的个毒株中,个属于基因停硗个为基因汀1狙究未分离到基因虳病毒。在对蜃樾蛄斜冉戏治鍪狈⑾郑駽型成员基因组略长于基因筒《净蜃椋直鹪赩基因和疷内有插入。同一基因型内的病毒序列同源性在%以上,而不同基因型病毒序列同源性不足%。死亡鸭的病变部位主要集中在肝脏,表现为肝脏肿大、出血及坏死等;同时伴有脾脏和胆囊肿大等病理变化。此外,本研究通过原核表达系统获得了//《镜个重组蛋白以建立觳夥椒ǎü冉仙秆。⑾,可以作为检测抗原。以此作为包被抗原,建立固寮觳夥椒ǎ⑾//腥竞蟮某嫉天开始发生血清阳转,天达到高峰,天之内抗体仍为阳性。为了进行募ε呤视Γ员阄R呙缪兄频鹊於ɑ。狙芯客ü樟浼ε呦盗鸡胚典型病变,利用该鸡胚传代适应毒株接种雏鸭,发现其对疾徊虏∽饔谩<绦至第代谐嫉慕又趾颓妆厩慷镜墓ザ臼匝椋⑾指貌《静坏ú灰鸪挤⒉。瓺
能对亲本强毒的攻击提供了良好的保护性。表明该毒株具有疫苗研制的良好性能。为了进一步说明鸡胚适应和致弱过程在基因组水平的体现,本研究对和幕蜃橛肫淝妆径净因组进行比较分析,结果显示,病毒在适应鸡胚过程中,病毒基因组发生了明显变化,主要表现为核苷酸的突变及其导致的氨基酸的替代,突变的主要位点位于、和蛋白。在以上研究基础上,本研究以弱毒株//蜃槲;。谢虻阃变的分子修饰,构建了全长的感染性分子克隆,通过体外转染赴螅赴涸ε吡ごǎ源ù恋代时对鸡胚的致病性、分子的鉴定均表明已成功拯救得