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药、,当蟆萘畏糵日期:乃,,年否月学位论文使用授权声明原创性声明体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集学位论文作者:本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑卅笱А1C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑ā\
要摘乙肝病毒蛟诟蜗赴┓⑸⒄怪凶饔及机制博士研究生孙长宇导师杨观瑞郑州大学第一附属医院郑州肝细胞肝癌琀劳雎示游夜┲⑺劳龅牡位,也是世界上因肿瘤死亡的重要原因之一。乙肝病毒,与男纬晒叵得芮校泄母伟ヒ陨衔R腋蜗喙匦愿伟赜械姆词郊せ罟δ芸赡苁荋引起肝细胞恶变的主要原因,也是近年研究的热点之一。乙型肝炎病毒鞍琀且恢侄喙δ艿鞍祝广泛参与病毒的复制、宿主细胞的基因调控和表达、蛋白质降解及信号转导等过程,在原发性肝细胞癌的发生发展中起关键作用。十多年前对乙肝病毒及其蛋白有很多的研究,但是仅仅确立了其在感染腍中促癌的特点,对于其在癌变转移、侵袭等恶性表型的研究尚不深入,而且对于其作用机制的研究尚需深入研究。近年来随着分子生物学技术的发展以及相关学科的发展,给核苷类似物抗乙肝病毒时代提出了要求,对于贖发生发展中的作用需要更进一步的探讨。,并探讨了鸵恍┲掳┖痛俳┍浞⑸⒄沟南赴蜃印蛋白质的关系,可能会对以后的研究提供一些思路和参考。本研究的目的:⒗妹庖咦橹Х椒ḿ觳釮癌组织、癌旁组织及摘要
⒒式鹗舻鞍酌福和骨桥蛋白在乙肝相关性肝细胞癌中的表达及其意义的研究方法:口木正常肝组织中⒐乔诺鞍及基质金属蛋白酶谋泶情况,探讨、与墓叵担沂綡术发生及转移复发的分子机制;⒔┫,观察宰H鞠赴裥员硇偷挠跋欤、将转染..、尿激酶纤溶酶原活化因子癗甂谋泶铮琋甂腄结合活性,进~步揭示贖发生发展中的重要作用及其机制,为⑸⒆R和复发的防治提供依据,并对后续的研究提供思路。利用免疫组织化学方法检测┳橹┡宰橹罢8巫橹蠬、、在癌组织、癌旁组织中多呈阳性表达,在正常肝组织中呈阴性表达。主要位于细胞浆中,部分位于胞核内,光镜下呈棕黄色。%、.ィ诎┡%、.┳橹氚┡宰橹实谋泶镂尴灾钜欤欢鳰~在癌旁组织中的表达强度高于癌组织,有显著差异性。癌组织与正常组间差瓾、和谟凶R萍鞍┲芙蟮陌┳%、.ィ飨愿哂谖拮R萍拔薨┲芙笳撸笳叩谋泶镅粜率分别为%、%、%,、癌旁组织中的表达与泶锞哂邢喙匦裕关系数分别为、和、,均有显著意义畂,呈直线正相关。摘要兰
第二部分俳烁伟┫赴闟鲋臣岸裥员硇偷实验研究方法结果分析,重组质粒转染组在大于胎约×陨..,以空质粒转染作对照,,并检测转染细胞的体外增殖、粘附、侵袭及运动能力。颐怯τ冒攵縍甈法检测转染..<∥,空载体转染组未见相应蛋白条带。瓻法检测细胞内及培养上清液中..皍的表达水平。结果显示:重组质粒转染组上述蛋白的表达水平分别为:/,对照组上述蛋白的表达水平分别为:./、./.痬/,重组质粒转染组上述蛋白的表达水平明显高于空质粒转染组,捣直鹞.,.,逋夤δ苁匝榻峁崾荆褐刈橹柿WH維赴螅湓鲋场じ健运动和侵袭能力明显增强,重组质粒转染细胞的黏附率为..%,对照组为..%,琍.。运动试验透膜细胞数分别为龊觯瑃.,G窒匝橥改は赴直为..龊个,.,摘要/、/、/和.。
.,分别为理组组/.《允て诘呐嘌赴毕赴诤隙却プ右时,用胰酶消化,将赴痩的细胞注入裸鼠左侧腋下皮下,每次注射鄄熘琢龅纳で榭黾奥闶笊孀纯觥K闹芎蟠λ佬∈螅饬恐琢的体积,法及免疫组织化学法检测小鼠肿瘤组织内蛈的表达,电泳