文档介绍：中国农业科学院人工感染传染性支气管炎病毒鸡气管和肾脏的蛋白质组学分析博士研究生:曹中赞师:刘胜旺研究员申请学位类别:农学博士业:预防兽医学究方养位:哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院提交日期密级:论文编号:指导教专研向:分子病毒学培单月
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\\\‘\\.磁争冷锨/锄椎一砖改夕/中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表人工感染传染性支气管炎病毒鸡气管和肾脏的蛋白质组学分析曹中赞研究方向培养单位芯克⒅行职称论文题目论文作者专业预防兽医学分子病毒学指导教师刘胜旺哈尔滨兽医研究所硕姓名单位专业签名导师博导口李庆教授翁长研究员张华中科院昆明动物研究博导√辩军事医学科学院委东北林业大学会议记录厥王永强论文答辩时间地点硕导口评阅人笈主章东北农业大学基础兽医学席江于力答堂所扈荣良华育硕导口‘平涂长春哈尔滨兽医研究所学术报告厅年/贝口
导师签名:时间:沙月θ研究生签名:曹字曾哮鹫独创性声明关于论文使用授权的声明月,上日时间:如,/年占月/时间:加,/年占C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签名:
和其鸡胚传代致弱毒株,摘要冠状病毒具有广泛的宿主范围,能够导致人和多种动物出现不同程度的呼吸道、肠道和神经系统的功能紊乱症状。年春季的出现及其感染并导致的高死亡率引起了人们对冠状病毒的高度重视。对冠状病毒的致病性以及致病机理的研究是当前研究者关注的热点之一。粲谘竟谧床《荆饕T诩仪莸钠堋⑸鲈唷⑾傥负蜕车赖绕鞴僮橹纳掀は赴懈粗啤拇úジ蚣仪菀荡囱现氐木盟鹗АR延械难芯恐っ鞑糠制渌谧床《镜母腥灸芄挥响宿主细胞的蛋白表达模式。本研究首次利用蛋白质组学以及相关的分子生物学技术对人工感染ε叩钠芎蜕鲈嘧橹牟钜毂泶锏鞍字省⑷斯じ腥静煌玖后不同阶段的鸡气管和肾脏组织的差异表达蛋白质进行了鉴定,并应用生物信息学工具对差异表达蛋白质的分子功能、生物学进程和亚细胞分布进行分类,旨在从蛋白质水平上探索胨拗鞯南嗷プ饔靡约癐的致病机制。。鉴定出了一些有显著差异表达的蛋白质。生物信息学分析表明这些蛋白质大多与细胞骨架组成、钙离子结合、能量代谢、抗氧化、应激反应、以及大分子物质合成有关,其中有些蛋白还具有调节细胞凋亡的特性。应用荧光定量际醵匀刃菘说鞍譩庵舅峤岷系鞍住⒃∏虻鞍譨、膜联蛋白、过氧化物还原酶.⒛ち5鞍譇⑾┐济福等种蛋白的转录水平进行了分析,结果表明这些蛋白基因的水平变化趋势和结果基本一致。分析进一步验证了热休克蛋白和膜联蛋白的表达变化,结果与表达模式的变化也一致。本研究着重应用‘,鉴定出种差异表达蛋白。生物信息学分析表明大部分差异蛋白与细胞骨架组成、急性期应答、抗氧化、应激应答、能量代谢,大分子物质代谢,信号转导和离子运输有关。用荧光定量际醵匀刃菘说鞍譩⒛ち5鞍譇⒉ㄐ蔚鞍住膜联蛋白、锰超氧化物歧化酶、线粒体磷酸烯醇丙酮酸羧基酶等种差异表达蛋白进行转录水平的分析,其动态变化趋势与蛋白质组学的结果大部分是一致的。用方法对三种差异表达蛋白膜联蛋白、膜联蛋白和热休克蛋白从表达水平上进行了验证,其结果与蛋白质组学得到的结果是一致的。实验结果表明,慷局阤疌疞/和鸡胚传代致弱毒株//感染能够诱导包括细胞骨架组成、抗氧化、应激应答、能量代谢等相关蛋白在内的一些在宿主应答过程中可能起重要作用的关键蛋白产生不同模式的表达变化,而且这种表达变化的差异主要发生在感染的早期阶段。本研究首次获得了较为完善的人工感染匀凰拗骷Φ钠芎蜕鲈嘧橹牟钜毂泶锏鞍质数据,为进一步阐释闹虏』恚约吧秆〉接屑壑档脑し阑蛑瘟埔┪锾峁┝擞屑壑档男息。同时,本研究结果也为等其他冠状病毒的相关研究提供了参考依据。关键词:传染性支气管炎病毒,蛋白质组学,鸡,气管,肾脏
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