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\厂唷鳓师一雾从柴利程讹璐中国农业科学院硕士学位论文评阅人、:生物所嵋槭阅柴团耀贝、口
导师签名:弛独创性声明关于论文使用授权的声明勘,甓嘣隆日研究生签名:毒;谴硷研究生签名:尚趁盐Ⅺ年衫月。劫,/年‘月本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。时间:本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
广摘要目前农业生产中,蚜虫危害十分严重,造成巨大的经济损失。转基因技术的发展为植物抗蚜品种的培育开辟了新的途径。已有研究表明,植物凝集素作为一种非免疫球蛋白,是一种潜在的抗蚜候选蛋白。因此,本研究拟以抗蚜虫的三叶半夏、掌叶半夏及海芋为材料进行凝集素基因的克隆,并导入到模式植物烟草中进行抗蚜能力分析,以期为植物抗蚜基因工程的研究提供新的基因源。主要研究结果如下:⒏菀鸦竦玫奶炷闲强颇鼗虮J厍蛄猩杓萍虿⒁铮猛纯寺〖际跻蕴崛〉娜叶半夏醋B嫉玫降腸D0澹ü疪扩增获得了约的基因片段,然后通过’技术克隆得到了该基因的全长序列,序列分析表明:该基因全长为,开放读码框为,编码霭被岬那疤宓鞍祝槐嗦氲鞍装个结构域,即甘露糖结合位点,推测其可能为凝集素基因;然后与已公布的凝集素进行同源性分析,发现该基因编码蛋白与其他天南星科凝集素基因编码蛋白相似性介于%一%,进一步说明了该基因可能为单子叶甘露糖凝集素基因,命名为凑障嗨品椒ǎ雍S笾谢竦昧艘桓龌虻娜ǔ蛄校蛄蟹治霰砻鳎焊没騝长为,编码霭被岬那疤宓鞍祝槐嗦氲鞍装个结构域,即甘露糖结合位点,猜测其可能为凝集素基因;然后将其与已公布的凝集素序列进行同源性分析,发现该基因的编码蛋白与其他天南星科凝集素基因的编码蛋白的相似性介于%一%,进一步说明了该基因可能为单子叶甘露糖结合凝集素基因,命名为⑽颐峭ü际醮诱埔栋胂闹锌寺〉玫搅艘桓龌虻娜ǔ蛄校蛄蟹治霰砻鳎焊没因全长为,编码霭被岬那疤宓鞍祝桓没虮嗦氲蛋白包含鯭峁褂颍锤事短墙岷衔坏悖虏馄淇赡芪D鼗颍和ü胍压ú嫉凝集素序列进行同源性分析,发现该基因的编码蛋白与其他天南星科凝集素基因的编码蛋白的相似性介于%一%,进一步说明了该基因可能为单子叶甘露糖凝集素基因,命名为⒔ɑ竦玫娜瞿鼗蚍直鸸菇薘和舳忧闹参锉泶镌靥澹⑼ü└司介导法转化烟草,获得了由启动子驱动的脚鋈呕虻淖;蜓滩葜仓辍⒂启动子驱动的;蜓滩菀呀锌寡良觳猓肿蛹觳庖仓っ髂康幕蛞颜系窖草基因组中。抗蚜结果显示转基因烟草不同程度的抑制了虫口密度,。⑽颐腔菇ɑ竦玫哪鼗蚍直鸸菇嗽吮泶镌靥澹诖蟪Ω司谐晒Φ谋泶锍隽撕S竽集素融合蛋白,并通过镍柱亲和层析对融合蛋白进行了纯化,为以后抗体的制备奠定了基础。其余两个基因的表达纯化正在进行之中。关键词:蚜虫,三叶半夏,掌叶半夏,海芋,
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目录第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯蚜虫防治研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..凝集素概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一解决问题的策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..:鲜褂昧街旨耙陨系目寡脸婊颉研究目的及意义:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参锊