文档介绍：:农学硕士研究单位:植物保护研究所提交日期密级:论文编号:硕士研究生:齐佳指导教师:吴孔明研究员专业:农业昆虫与害虫防治方向:昆虫生化与分子生物学培养研究生院月
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徘竹虢\‘\泐‘绗幻坻峨‘\.≯搿托\\\.\\\革中国农‘业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表扎峰论文作者业研究方向指导教师培养单位芯克⒅行职称单论文题目专姓名位签名利用噬菌体展示技术筛选毒素受体结合表位的研究农业昆虫与昆虫生化与分子齐佳害虫防治生物学吴孔明研究员植物保护研究所评阅人答辩委员会议记录厥论文答辩时间地点盲评主郭予元研究员中北京农林科学院张芝利植保环保所中国科学院动物所王琛柱张青文教授中国农业大学张友军中国农科院蔬菜所王振营·高希武陆宴辉副研究员年号中国农科院植保所第一会议室,、一,’.
研究生签名::,嘣拢独创性声明关于论文使用授权的声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:时间:
摘要利用苏云金芽孢杆菌珺杀虫基因发展的作物已经成为防治多种害虫的新手段。转钩婷藁ㄔ谖夜ü行Э刂泼蘖宄娴奈:Γ山档椭裁蕹杀竞吞岣棉花的产量,但随着藁ǖ拇竺婊乒悖蘖宄娴目剐苑缦詹欢仙仙现赝睟棉花的持续利用。毒素是新一代棉花的主要杀虫成分,已有研究证明棉铃虫对与毒素没有交互抗性,因此可通过种植新一代棉花治理对棉花的抗性。但到目前为止,国内外对在棉铃虫中肠内的受体结合蛋白种类和受体结合表位等尚不清楚。鉴于毒素与昆虫中肠受体的结合是发挥作用的关键步骤,寻找棉铃虫中肠上皮细胞上的毒素结合蛋白和结合位点,对阐明毒素作用机理,发展棉铃虫抗性治理技术有重要意义。本文应用噬菌体展示技术,对毒素模拟表位进行了体外筛选,并验证了模拟肽序列的生物学功能。毒素在活化并纯化后,经“吸附一洗脱一扩繁”的稚锾匝。⒍匝粜钥寺∷带的外源谓行蛄胁舛ê螅玫接牖罨疌舅鼐哂懈咔缀土Φ哪D怆男蛄和。,加入的两段多肽序列,可以抑制活化与棉铃虫中肠的结合。将两段模拟肽分别与毒素孵育后,饲喂初孵棉铃虫可显著降低毒素对棉铃虫的致死和生长抑制作用。对活化的治龇⑾郑舅卦诿蘖宄嬷谐洗嬖和两个结合蛋白。上述实验表明,筛选到的模拟肽序列具有明显的生物学功能,其可能与毒素在棉铃虫中肠内的受体结合位点具有相似的氨基酸序列或空间结构。笛橹っ鰿舅主要存在两种受体蛋白,其作用的发挥可能有赖于与这两种蛋白相关作用因子的调控。综上所述,噬菌体展示技术为研究毒素作用机制提供了新的手段,对深入明确不同毒素作用方式的差异和害虫对毒素的抗性机理有重要价值。关键词:抗性,噬菌体展示,,表位筛选
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目录第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。简介及转基因抗虫作物研发概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..狟蚩钩孀魑镅蟹⒏趴觥毒蛋白的作用机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.芴宓鞍籽芯扛趴觥类蛋白作用机制研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.抗原表位研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯赴乖砦谎芯糠椒ā赴砦谎芯糠椒ā噬菌体展示技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章毒素蛋白的提取纯化和生物测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。第三章噬