文档介绍：学位论文拟除虫菊酯类农药降解基因的表达、炕及活性分析硕士研究生:许玮指导教师:许雷研究员申请学位类别:理学硕士研究方向:农药生物工程培养单位:研究生院专业:微生物学提交日期月
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独创性声明关于论文使用授权的声明研究生签名:’千韦研究生签名:湃却扫年易月日Ⅺ辍Ⅻ辍吗矲本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同疗式在不同媒体⒈怼⒋úパ宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荨时间:导师签名:本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同:鞯耐对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
山/仵多阉鸪目研强,枥故薯黼口敞\\‘\\\勿椭锯汉钾橛协步住纹锄’幺凝彦一易中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表/论文题目拟除虫菊酯类农药降解基因的表达、纯化及活性分析微生物农药许玮专业研究方向工程指导教师许雷研究员培养单位芯克研究生院硕职称,单论文作者微生物学姓名位签名‘导师生物化学与关雄教授福建农林大学阅博导√分子生物学农业昆虫与人侯玉霞中刘进元清华大学中国科学院微生物研肖凰研究员博导、,究所答中国农业科学院农业朱昌雄’环境与可持续发展研环境科学辩中国农业科学院植物农业微生物委保护研究所谢明副研究员员博导口会议记录厥论文答辩时间地点评张杰硕导√。,’
捅姜近年来,随着拟除虫菊酯类农药的广泛使用,由菊酯类农药残留产生的环境、食品污染和农产品国际贸易问题越来越严重,菊酯类农药的生物降解逐渐成为研究的热点。本论文以课题组已克隆的拟除虫菊酯类农药降解基因:3龇⒒颍辛嘶虿锒级、高级结构的生物信息学分析;全长基因序列和具反应活性结构域基因序列的原核表达:表达产物的电泳检测、复性及复性条件;表达产物的反应条件、环境稳定性及对农药的降解等方面的研究,为进一步利用降解酶基因资源研制拟除虫菊酯类农药降解酶制剂,解决农产品农药残留提供技术平台。的生物信息学研究表明:.%的菪サ腂折叠、サ膒转角和.%的无规卷曲。螺旋存在明显的结构域差异性,;具有两个结构域,第一个结构域包含前霭被幔朊复呋钚韵关,第二结构域包括剩余霭被;的催化位点为珹蚻;中存在钙结合位点,分别为蕖站嚣历级全长编码基因和催化活性结构域编码基因的原核表达研究表明:全长编码基因的表达产物具酯酶活性,而单一催化活性结构域编码基因的表达产物无酯酶活性,证明的第二个结构域虽然不具有催化位点,但可能与酶活性构象的形成密切相关;原核表达的主要以包涵体形式存在,包涵体可经疞的尿素有效溶解;分解Ⅱ醋酸萘酚实验证明该酶具有羧酸酯酶活性,以羧酸酯酶活性为检测指标的实验表明:表达产物的最佳复性条件为:、浓度疞、蛋白浓度。对活性表达产物的理化性质研究表明:该酶的最适反应条件醋酸萘酚为底物#浓度/⑽露妗F嗌准觳饣钚訣圆糠峙┮┑慕到饨峁砻鳎该蛋白对拟除虫菊酯类农药高效氯氰菊酯、氯菊酯、氯烯炔菊酯、功夫菊酯及有机磷类农药毒死蜱有降解能力,℃条件下温育八小时对上述农药的降解率分别为:高效氯氰菊酯:.%、功夫菊酯:.%、氯烯炔菊酯:.%、氯菊酯:.%、毒死蜱:.%。极端环境实验表明:叭表达产物具高温、强酸、强碱的耐受性,℃温育,酶活性仅下降%;甇酶活下降%;酶活下降。关键词:生物降解,拟除虫菊酯类农药,有机磷农药,原核表达,降解酶、
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目录.┮└趴觥.┮┎辛艏捌湮:Α.┮┎辛舻闹卫矸椒ā拟除虫菊酯类农药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...獬婢挣ダ嗯┮┑┮┑┮┳┮┦┯┮┪:┮┪⑸┮┙到饷傅难芯俊研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第二章基因编码产物的结构分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..氨基酸组成及等电点分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二级结构分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯信号肽分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯