文档介绍：中国农业科学院学位论文棉花胞质雄性不育系与保持系线粒体基因组差异研究博士研究生:张晓指导教师:郭三堆研究员申请学位类别:理学博士业:生物化学与分子生物学研究方向:植物基因工程培养单位:中国农科院生物技术研究所中国农科院研究生院密级:论文编号:魎专提交日期月
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翩獬。仰三彬代研究生签名:参莎旎独创性声明关于论文使用授权的声明聄时间:如年易月C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵时间:幻『时间:却,月本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签名:日
物舰懒\\卵绣‘\\‘\\.庐函硷刎蟛以∞谓銄翵参刁缎纯彩鼻与·寻铡、嗣伪‘一墼中国农业科学院博导一博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表博导陟博导∥⒅行技术研究所单论文题目生化与分张晓子生物学指导教师硕姓名职称位签名导师硕导口评博导口阅人答辩马峙英教授河北农业大学作物遗传育种席中国科学院微生物研谭华荣研究员究所微生物学中国农业大学生物学生物化学与分肖兴国院中,中国农业大学农学与委生物技术学院刘德虎中录厥、论文答辩时间地点主硕导口,、,.
,砌摘要棉花细胞质雄性不育悄感砸糯宰矗谠咏幻拗浦种杏兄匾5挠τ眉壑怠Mü育系、保持系和恢复系的“三系”配套,以及“三系法”制种,可实现杂交棉种子规模化生产。目前,国内外已育成哈克尼西棉、三裂棉、陆地棉、海岛棉等胞质的不育系,并实现三系配套,其中陆地棉胞质不育系丛从为核心的三系配套已应用于生产实践。导致植物细胞质雄性不育的基因被认为是位于线粒体基因组上,但是关于棉花喙鼗虻难芯勘ǖ很少。本文以及其保持系、恢复系为主要实验材料,对其线粒体基因组进行了分析,克隆了不育胞质和可育胞质之间的差异序列,获得了胞质特异的、、肿颖昙牵⒍圆钜煨蛄薪辛吮泶锓治觯=徊娇寺〔挥虻於嘶本研究通过同源克隆的方法,获得了棉花个线粒体基因的保守序列,从中选取个基因做探针对不育系、保持系、恢复系的线粒体基因组蠸分析,发现、、、、、等龌蛟诓挥屎涂捎问存在多态性。其中基因的差异最明显,它在可育胞质和不育胞质中的两个片段均不相同。利用反向椒ǎ寺〉搅丝捎屎筒挥手衋虻乃蠩限制片段。在此基础上,应用方法,获得了可育胞质和不育胞质中基因的所有限制片段。在可育胞质中,拗破纬ざ确直鹗,拗破蔚某度分别是;不育胞质中,拗破纬ざ确直鹗和限制片段的长度分别是。序列分析发现,棉花基因在可育胞质和不育胞质中各有两个拷贝:一个完整拷贝和一个囟绦涂奖础M暾鸻蛉ǔ捎胞质和不育胞质中的截短型编码序列分别在处截断。,可育胞质和不育胞质存在差异,是一个坏悖梦坏阍赑捎手惺,在哈克尼西棉瓺、、晋⑾嬖禔不育胞质中是谌棉狣胞质中是颐墙淇7⒊蒘标记:。在截短型拷贝片段上,即编码序列截断位点岸系恪后,可育胞质和不育胞质中分别存在一段的差异序列,这两条差异序列完全不同,我们将其开发成蚐标记。这三个标记可用于鉴定棉花可育胞质和不育胞质。根据以上结果,对国内外的几种不同得藁ǖ膍进行了分析和差异片段的序列分析,发现在基因位点,、、晋⑾嬖禔这四种档腞计相同,而与瓺⒔鶤、湘远疾煌Mü齌椒ǎ隆到了瓺牟钜霦限制片段⑾制渲械男蛄杏隤啾却嬖处位点,根据坏悖7⒊:,该标记可将狣肫渌到星帧应用方法对进行表达分析,发现棉花可育胞质和不育胞质中全长基因和截短型基因均转录。分析基因的嗉榭鍪狈⑾郑藁╝蛉ǔた奖癗和
列,开发出瓺侍匾霺肿颖昙恰M狈⑾謓’部分编码序列成为短重关键词:棉花,细胞质雄性不育,线粒体基因组,,,,写嬖处嗉坏悖也挥视肟捎实腞编辑率基本相同;在截短型拷贝中存在编辑位点,不育胞质的嗉拭飨愿哂诳捎剩得鞑挥式囟型拷贝可能仍承受较高选择压,很可能具有新功能。同时,利用环化ǹ隆到不育胞质全长拷贝和截短型拷贝的转录本全长,发现全长拷贝转录本中包含完整位点;截短型拷贝转录本中包含完整“”序列。在基因嘁砬嬖谝恍┒讨馗葱蛄校庑┬蛄欣醋杂趆’部分编码序列。在不育胞质中