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雹彦懂’聊躲甬钥萝//日期:如//年乡月日期:加ε碓日论文作者签名:恺玉论文作者签名::讫玉话原创性声明学位论文版权使用授权说明“咝Q宦畚娜氖ǹ狻敝腥姆⒉迹⒖砂础罢鲁獭敝泄娑ㄏ硎芟喙厝ㄒ妗;赝嗜暌自乱日年占月日期::所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。日期:本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海南大学和中国热带农业科学院所有。保密论文在解密后遵守此规定。导师签名:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦畚奶峤提交后滞后:口半生;年;口二年发壶。、
%丛谑菘庵姓业酵制被启动以及各种信号通路被激活等现象,表明割胶产生明显的库效应和伤效应,割胶应答涉及多个不同功能类别基因的参与。分离到多个参与蔗糖转运、蔗糖分解代谢、糖酵解、三羧酸循环和磷酸戊糖途径的巴西橡胶树奶烊幌鸾菏枪叵倒泼裆闹匾9ひ翟和战略物资,我国自给率严重不足,但因实际植胶面积己达极限,大幅提高橡胶单产成为发展我国天然橡胶产业的唯一可靠出路。在正常割胶的橡胶树中,乳管细胞的主要代谢活动是进行胶乳的再生,而胶乳再生能力的强弱是决定橡胶树产量的主要因素之一。胶乳再生涉及到一个复杂的生理生化过程,但是生物体的一切外在表现都离不开内在相关基因的表达调控。因此,高通量研究胶乳再生过程中转录组水平的基因表达情况,将为筛选鉴定胶乳再生关键调控基因和阐明胶乳再生的分子机理奠定良好基础,也为橡胶树定向分子育种提供重要的靶标基因和理论指导。‘在未开割橡胶树中,割胶对胶乳再生的促进作用表现得尤为突出,这一特性使其成为研究胶乳再生分子调控机制的理想材料。本研究使用高通量手段比较分析了未开割橡胶树开割后前几个刀次胶乳转录组的表达谱,主要研究结果如下:,使用彳矽疢盖刑逑等ú对选择性引物组合,分析了割胶后前龅洞谓喝閙谋泶锴榭觯扛鲅竟卜离到约条转录衍生片段。以第督喝門表达量为参照,、测序和同源注释;并结合本实验室胶乳菘夂妥⑹徒峁媳泶锬式和注释均一致的差异片段,最终获得龇侨哂嗟腄甌渲杏个呈上调表达,鱿碌鞅泶锖个钟型表达壬系骱笙碌骰蛳认碌骱笊系。功能分类结果显示,其中的..与功能分类明确蛋白同源,匹配序列。依据这龉δ芊掷嗝魅返腄甌谙赴谛惺沟墓δ埽浞治个类别,按所占比例由高到低依次为:转录和蛋白质合成、胁迫和防御、转运蛋白和胞内运输、信号转导、蛋白质降解和贮存、初级代谢、能量、细胞生长和分裂、细胞结构、次级代谢和橡胶烃生物合成。秆〉蕉喔鼋喝樵偕喙鼗颍醪讲土私喝樵偕募父龉丶煌揪在未开割橡胶树割胶后的前龅洞危孀鸥罱夯疃慕校楣芟赴诔鱿謒和蛋白质合成能力增强、物质运输能力加大、蛋白质降解和更新速率加快、胁迫防御机基因片段,它们多数受割胶调控呈上调表达;值得注意的是,筛选到的鱿鸾禾合成基因全部随割胶上调表达,由此推测蔗糖的供给与糖代谢调控、橡胶烃生物合成是
未开割橡胶树割胶后乳管细胞代谢活动的主要内容,同时也是胶乳再生能力增强的主要甤瓵际跏巧秆∠鸾菏鞑钜毂泶锘虻挠行铱煽渴侄随机选取约腄甌杓铺匾煲铮褂冒攵縍治銎浔泶锴榭觯发现有.%,表明本次筛选工作的可靠性高。同时,。本文研究结果不仅有助于进一步筛选与鉴定覆盖整个胶乳再生调控网络的关键基因,而且初步阐述了决定胶乳再生调控的几个关键代谢途径,为深入揭示胶乳再生的分子机制提供理论依据。关键词:未开割巴西橡胶树,割胶,胶乳再生调控,—,转录衍生片段,基因表达分析原因。
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!H楣堋胶乳再生调控机制的分子生物学研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...技术是高通量筛选差异表达基因的有效途径⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.把浴质粒与菌