文档介绍：中国农业科学院学位论文海岛棉錌亲樽B家蜃基因的克隆与特征研究虰博士研究生:刘坤指导教师:李付广研究员申请学位类别:理学博士业:生物化学与分子生物学研究方向:植物分子生物学与基因工程培养单位:中国农业科学院棉花研究所中国农业科学院研究生院密级论文编号:专提交日期月、
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\俐、御‘\\\\.郝囊专辛幼科身气、专杉铊罕列帷蔎誸年汉投蔎啪僚话谚中国农业科学院博士学位论文评阅人、∮胩卣餮芯生化和分植物分子生物学论文作者刘坤专业研究方向子生物学与基因程指导教师李付广培养单位芯克⒅行中棉所硕姓名职称单位专业签名导师博导口研究员河南省农科院作物遗传育种教授博导囱河北农业大学硕导囱宋录厥硕导口评阅人答辩主房卫平席博导函华金平中国农业大学王省芬硕导团农产品与食品安全杨伟华委员论文答辩时问地点.
:少“独创性声明关于论文使用授权的声明草‘专產时间:∥≯甓嘣鲁鏡本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科。学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名:
、舘、珿掳嘶,兀等多个基因明显增加,上调幅摘要度在兑陨希籊和礁龌蛑挥写砬暗娜种蛔笥遥籊驞基本没有变,,Ⅲ。的功能,暗示这些基因参与防卫反应过程。另外,构建超表达载体将亚组佑鷕兄棉花是重要的经济作物,各种病害特别是黄萎病严重影响着棉花生产,基因工程技术的发展为棉花抗病育种提供了新途径。遄B家蜃油ü鼸域和産等顺式元件相互作用,调控下游基因如病程相关蛋白基因的转录过程,从而改变植物抗病、抗逆性状,在植物抵抗生物和非生物胁迫中扮演重要角色。遄B家蜃臃治2煌槔啵渲蠦亲槌稍蓖ü系髌舳子中含有<虻淖B蓟钚裕銮恐参锾蹇共⌒裕鳥亲樽B家蜃佣云舳又泻有虻淖B蓟钚云鹨种谱饔茫哂蟹乐瓜掠位蚬燃せ畹墓δ堋?寺≌饬窖亲榛颉探究其生物学功能,对农作物抗病性状的遗传改良具有重要意义。为了克隆与棉花黄萎病抗性相关的/亚组转录因子基因,本研究首先利用陆地棉进行电子克隆,获得个亚组和鯞亲槁降孛轊族基因。然后根据海岛棉和陆地棉的同源性及遄B家蜃拥谋J匦裕曰莆〈淼暮5好抻酌鏴D0澹肞技术扩增出个具有完整阅读框的同源基因,其中个是第一次从海岛棉分离出的新基因。利用实时荧光定量技术,对大丽轮枝菌孢子液处理的海岛棉幼苗根组织中各基因转录本量分析发现:化;其它基因虽有上升,但上调幅度较小,都在兑韵隆@肦际趵┰龌虻’.和获得龌蛉ǔ蛄校直鹈狦篋,珿在利用生物信息学对龌蚍治龅幕∩希菇℅瞬时表达载体转化洋葱表皮细胞进行亚细胞定位分析,结果表明四个转录因子均分布于核内;利用吮泶锞辏泶妥B家蜃尤诤系鞍祝炕蠼心鹤柚褪笛椋っ魉呛虶能够特异结合;构建超表达载体转化烟草,对代植株进行半定量和荧光定量分析发现,和在转基因阳性植株中均得到异位表达,而防卫基因蚇的转录本量相应地减少和增加,该结果表明和分别具有下调和上调蚇基因转录活性基因转入陆地棉,实时荧光定量分析表明阳性棉株中几丁质酶蚿..葡聚糖苷酶基因的转录活性下降;测量;蜓粜悦拗甑睦胩逡镀史⑾直仁芴逡镀菀失水,表明虿唤霾斡朊藁ǖ姆牢婪从蹋矣胫参锏乃执簧砉堂芮研究表明这些基因参与棉花对黄萎病菌防卫反应的应答过程,可能参与棉花对黄萎病抗性的调控。有关转基因阳性株系对黄萎病菌抗性水平的鉴定分析研究,正在进行之中。本研究为抗黄关键词:海岛棉,棉花黄萎病,B家蜃樱蚩寺。;蛎藁虶⑻峤坏絅菘猓⒉岷欧直鹗荍相关。萎病相关基因的筛选奠定了基础。
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目录第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅸ棉花黄萎病及其基因工程育种研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...藁ɑ莆『〔≡≈虏』】】』蚬こ逃止ぷ魅〉贸杉ê⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯