文档介绍:业:瓣中国农业科学院学位论文向:蔬辕群荆甘蓝转蚦双价研基因的研究硕士研究生:仪登霞教师:杨丽梅研究员申请学位类别:农学硕士研究培养单位:蔬菜花卉研究所中国农业科学院研究生院密级:论文编号:指导专方提交日期年
/煳嬲莒..一
私厉韬仅登良研究生签名:仅登独创性声明关于论文使用授权的声明知“年‘月先如年彭月日时间:趂暾荚聑汨本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名:
拗趔勰哆犯铭备‘\\.‘\\谰胗孙汐三论文题目甘蓝转蚦双价研基因的研究论文作者仪登霞专业蔬菜学研究方向蔬菜遗传育种指导教师杨丽梅培养单位芯克⒅,
摘要是一种重要的十字花科蔬菜,在蔬菜周年供应中占有重要地位。近年来,随着栽培面积的逐年扩大,甘蓝的虫害日趋严重,其中以鳞翅目的小菜蛾筒饲喑等为害最为严重。目前生产上害虫的防治以施用化学药剂为主,但化学农药污染环境、对人畜有害,且一些害虫已对多种化学杀虫剂产生了抗药性。培育抗虫品种是防治害虫最有效的方法,但在甘蓝中抗虫资源缺乏。利用植物基因工程技术将外源抗虫基因转入甘蓝,可为甘蓝育种提供有效的抗虫种质资源。蚦基因是由中国农业科学院植物保护研究所自主分离克隆的。镜白对小菜蛾和亚洲玉米螟具有很强的杀虫活性,镜鞍锥孕〔硕辍⑿≡骋都缀图矣哂很好的控制作用,并且虲与生产上常用的喽镜鞍字涿挥薪换タ剐浴创制同时含有蚦双价基因的甘蓝,可以有效地抑制小菜蛾抗性的产生,为小菜蛾的抗性治理提供强有力的支持。本研究优化了甘蓝的再生体系和遗传转化体系,利用根癌农杆菌介导法将蚦双价基因导入甘蓝高代自交系,主要研究结果如下:世对偕逑档挠呕以龈世蹲越幌滴2牧辖辛嗽偕逑档挠呕好缌淇刂圃激素配比为/腗嘌⑻砑佑蠥/保上灾高不定芽的分化率,最高再生频率达到.%。世陡咝б糯;逑档慕以重组质粒表达载体琧基因;世叮呕伺└司榈嫉母世兑糯化体系:当选择培养基中激素配比为/⑻砑佑蠥/蹦芟灾俳欢ㄑ康脑偕;德首罡呖纱锏ァ世蹲猚和ḿ垩锌钩婊蛑仓甑幕竦利用根癌农杆菌介导法将蚦双价基因导入甘蓝中,共获得株卡那霉素抗性植株;分子检测证明蚦双价基因已被成功整合到甘蓝基因组中并得到表达;其中觳庋粜灾仓辏琒检测阳性植株株,和为阳性的植株有株;抗虫性鉴定结果表明部分转基因植株不仅对敏感小菜蛾具有很强的杀虫活性,而且对抗性小菜蛾也有很好的控制作用。关键词:结球甘蓝,历双价基因,遗传转化,小菜蛾,抗虫性结球甘蓝∮孟屡咧嵛M庵蔡澹检测均//畍.
毗甇,..,..甅,,,.,..,.圮瓾/.%..,Ⅱ
目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..植物转基因研究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;蜓芯糠⒄;蜓芯拷埂甘蓝类蔬菜抗虫转基因研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..世独嗍卟嗽偕逑档慕⒂;逑档慕⒂@蜓芯拷埂研抗虫转基因作物应用存在的问题及应对策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..本研究的目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章结球甘蓝高效再生体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯虯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...
第三章结球甘蓝遗传转化体系的优化