文档介绍：:篜:篟’;`琛#弧冢恪荩。耋;雪连丁
一
热日吭矽论文作者签名:名聋荡日期:工·年侣奕海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明学位论文版权使用授权说明沙日期:和,,年/月穸日副日提交‘高校学位论文全文数据库”中全文发布,并可按“章程”中规定享受相关权益。凰塞途塞握銮卮澄卮:旦坐生;旦鷌童三生筮查。鸸期本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究二亡作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名:本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学畚摹1救嗽诘际χ傅枷峦瓿傻穆畚某晒J恫ü槭艉南大学和中国热带农业科学院。本人已经认真阅读‘高校学位论文全文数据库发布章程”,同意将本人的学位论文签玳,】:
摘要微藻是一类在陆地、海洋广泛存在,光合利用度高的自养植物。微藻作为一种低等植物,其最大特点是种类繁多、分布广泛,繁殖快速。微藻含有十分丰富的甘油以及酯类,因此微藻可作为制备生物柴油的优良原材料。作为微藻产油开发和利用的前提:理想藻种的选育、改造以及藻种最佳培养条件,都已成为国内外普遍关注的研究课题。自然环境中存在丰富的藻种资源,因此直接从中筛选出理想的藻株是目前使用的最为广泛地筛选方式之一。本实验用己从自然环境中筛选出的高含油藻株微芒藻J笛椴牧希ü翁в敕肿由镅嘟岷的方法,对其进行了种属分类。培养基成分对微藻的油脂积累有很大的影响。实验通过四种不同培养基、虰营养盐限制的培养条件下,培养微芒藻靡怨鄄馕⒃宓纳ぜ坝椭矍榭觥=峁砻鳎喝钡E嘌保微藻中性脂的含量在不同培养基中均有提升—,其中高碳培养基甆中性脂含量超过一般康氖兑陨稀6碧嘌灾行灾幕坌Ч明显。然而无论缺乏何种营养元素都将显著地降低生物量的增长。通过物理、化学和生物等人工诱变的方法去寻找理想藻株是另一种筛选藻株的方式。本实验以模式藻株莱茵衣藻迦胪槐人工诱变的方法去寻找理想藻株。以虷培养基中筛选出油脂含量同时升高的突变株辍T贖培养基中筛选出突变株甅,中性脂含量与野生型啾忍岣吡%,达到细胞干重的%。在嘌中突变株,中性脂含量分别提高了%、%,达到%、%。利用生物基因工程和生物代谢工程等手段“人工制造こ淘逯辏堑谌筛选藻株的方式。实验克隆了影响铣纱坏墓丶駽虻牟分片段,构建了基因的表达载体。转化莱茵衣藻峁砻髟谠げ獾种基因中只有沉默和基因后,中性脂含量才会显著下降。在校行灾糠直下降%和%,而谢虺聊;铀劳觥K得鰿虲基因才是真正的具有表达合成匏倜傅幕颉实验构建基因过量表达载体,过量表达和基因,并且进行基因的亚细胞定位。结果是用嘌龉讨校过量表达转化子的中性脂含量与野生型啾染岣ィ畲笾行脂含量分别为%和%。基因的亚细胞定位结果显示,和
基因是在细胞质内表达的。目前在研究微藻选育方面,主要有以上三种方式。本实验通过这三种方式,寻找理想的产油藻种。并探索可能的基因作用机理以及作用场所。这为继续研究微藻产油的机理打下基础。关键词:微藻选育、人工诱变、、技术、基因沉默与过量表达、亚细胞定位
.甌甌加竐,,.”,琣讼,—%..%ィ畉%%甆..:,甀.¨,:..畉瓵甶甮】【.,
甌緇峨,琤甌猵.:琽瑂瓵
中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.引言悸⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·一、文献概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二、微藻产油策略一:微藻选育和营养盐限制培养⋯⋯⋯目录...·.···································································ぁぁぁぁぁぁぁぁぁぁぁぁぁ传统化石燃料与生物柴油⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯生物柴油与油脂原料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯生物柴油与微藻产油⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⑽⒃迳锊裼偷睦费馗铩⑽⒃宀偷募际趸方凇、理想藻种的选育⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯、产油微藻的培养条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯、培养方式对油脂积累的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯、产油微藻培养技术的改良⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二酰基甘油酰基转移酶:一个催产合成三酰甘油的关键酶素⋯⋯⋯⋯⋯’基因的发现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯基因的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯