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时阀:如年占月仍研究生签名:疽曝В论文作者签名:.丁≥参,:,,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵时『日河模瑀年石月门本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,,也不包含为获得中网农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使瘸过的材料。与我一同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文巾作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中囡农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:巾国农业缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中困农业科学院可以用不嗣方式在不网媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
摘要扇,旱币恍┬》肿恿康耐庠此碦胨丰细胞后,特异地降解相应序列的,从而导致转录后水平的基因沉默。导的抗病毒最有效的途径是构建病毒特定基因片段的反向重复序列载体,之后转入植物中,转录后生成⒓薪峁,发夹结构的柄町诱导转录后基因沉默,从而达到抗病毒的目的。利用根癌农杆蔺介导的瞬时表达系统来研究植物基凶功能的报道很多,它不仅可以快速地导入外源基凶,而且使转入基因在短时间内表达,从而在功能基因组学上面发挥巨大的作用。葡萄病毒既是危害葡萄最为严重的病毒之一,分布广泛,又是少数能摩擦接种到草木寄恋钠咸巡《局唬资U寡芯抗ぷ鳎梢源渌《镜南喙乩砺畚侍夂陀τ檬导研究。因此本文以硕鞍蛭D0謇┰龀隽的基因片段,根据扇诺基本原理,构建了扇旁靥澹⒊晒ψ;礁┡└司校ü彩北泶锢醇觳飧扇旁靥宓抗性效果。丰要的试验结果如下:灼蔚目寺∮胄蛄蟹治觯荷杓埔锟寺≈柿械囊桓龌蚱危ü配以不同的酶切位点,分别命名为:和,长度都为蛄蟹治鲋っ髡饬礁銎段为目的基凶片段,可用于构建扇旁靥濉甊干扰载体的构建:通过酶切、连接、确椒ń康钠握聪蚍直鸩迦氲皆靥内含予的两侧,来构建干扰载体,经菌液兔盖屑ㄖっ鞲扇泶镌靥逑蚺└艘裰械淖;和ü橙诜ń玴瓽向农杆荫中进行转化,菌液觳饨狒斜砻骰竦昧撕斜泶镌靥宓呐└司鶨彩北泶锓治觯合虮臼涎讨凶⑸渑└司蠼覶ü硇凸鄄旌蚉检测得出:①瞬时干扰作用具有时问依赖性:农杆菌渗入,,后接种圆《镜母扇判Ч好,没有病症出现,而农杆菌渗入后接种蛎挥斜硐殖鋈魏慰剐裕ú抗鄄斓讲≈ⅰ②%,且抗性植株上没有表现出任何病症,而对照组则全部表现病症。说明干扰载体在草本植物本氏烟上对硐殖鼋锨康目剐裕进一步在木本植物葡萄上进行研究。关键词:葡萄病毒辉硕鞍谆譓籖干扰;载体构建:瞬时表达载体构建成功。
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目录疉挠τ谩第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯葡萄病毒捌咸巡《静》《静『《《静》揽匮芯肯肿础的作用机制及其应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的发现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一的机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一本研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.试剂与材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.柿的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一基因片段的克隆与序列测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.└司械淖;.└司敕ń榈嫉乃彩北泶铩.