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学位敝能州醐:训年侣日期:为¨年罗月扩日原创性声明学位论文使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。
表达融合基因腺病毒载体的构建及其免疫活性的研究摘要的优点是可以一肝多用,使更多的人得到移植机会,降低等待肝源时的死亡率,博士研究生王鹏导师阚全程教授郑州大学第一附属医院内科学河南郑州研究背景:器官移植是治疗终末期器官疾病的重要方法之一,但供源缺乏和排斥反应是困扰器官移植的两大难题。肝细胞移植畲因此有可能取代原位肝移植糜谥漳┢诟脏疾病患者,但免疫排斥仍是需要解决的一个重要问题。随着现代基因工程的发展,具有免疫逃逸功能的转基因肝细胞成为的研究热点。腺病毒载体能够将外源基因安全而高效地转染入多种细胞,因此被广泛地应用于基因治疗的各个领域,但宿主对基因表达产物的排斥反应严重地限制了基因治疗的发展,临床现有的免疫抑制剂并不总是有效,而且毒副作用大。因此,降低或消除机体对外源基因表达产物及其转染细胞的免疫反应,成为长期基因治疗中的研究热点。主要组织相容性复合体琈乖实途径在免疫排斥方面的研究中越来越引起人们的关注,阻断豢乖母合物的表达,成为诱导免疫耐受的研究热点。拗菩韵赴拘訲淋巴细胞珻诓《靖腥局蟹⒒幼胖匾W饔茫扇鸥腥鞠胞表面喾肿涌乖实萃揪独刺颖芩拗髅庖咔宄牟呗员恍矶嗖《舅用。单纯疱疹病毒琀虮嗦氲牧⒓丛缙诟摘要
第一部分表达诤匣蛳俨《《镜拿庖呋钚匝芯染性细胞蛋白,能与抗原多肽竞争抗原加工相关转运子,的肽结合位点,有效地降低氖侗鸷蜕鄙嘶钚裕右菟拗鞯拿庖咔宄因此,本研究构建了一种表达甀融合基因的腺病毒载体,并研究其免疫活性,以期能够为研究机体免疫耐受机制和基因治疗提供重要的探索方向。此外,这些研究可能为拓展病毒免疫学领域,探索病毒和宿主免疫系统之间的相互作用提供了新的研究方向,并为临床疾病的治疗和预防拓展了更广阔的空间。目的:《荆⑶医欣┰龊偷味炔舛ǎ以便用于其免疫活性的实验研究。方法:《颈泶镌靥逑低彻菇ū泶颒—,用盖泻笥胂俨《竟羌茉靥錺在菌内同源重组构建重组腺病毒载体琍盖邢咝化后,。以同样的方法构建对照空载重组腺病毒W钪眨┰霾⒓觳病毒滴度。结果:重组腺病毒甀和菇ǔ晒Σ⑶揖哂辛己玫母腥拘裕梢栽赴邪俺刹《究帕!V刈橄俨《/。结论:复制缺陷型重组腺病毒甀和晒菇ǎ《镜味雀撸芄在细胞内有效地转染和表达,能够满足下一步免疫活性研究的要求。摘要Ⅱ
..%尴灾圆钜胗。觳饨峁允荆胫刈橄俨《緍组和正常对照组相比,《镜拿庖呋钚浴方法:刈橄俨《,,并用ú舛–。越】等送庵苎5ズ讼赴为来源,体外诱导培养树突状细胞珼舛ㄖ刈橄俨《騬对转染淖H拘剩⑶也捎肕法测定第时重组腺病毒甀或宰H綝刺激淋巴细胞增殖活性的影响。刈橄俨《緍或H玖馨拖赴舛ㄗH拘剩⒔行双向混合淋巴细胞反应—采用ǚ直鹩诘⒌。结果:刈橄俨《,感染效率随着感染复数琈叨摺5盡为时,重组腺病毒甀和訦赴淖H拘.±ズ.±均明显高于淖H拘.±ズ。隡为淖H拘.±ズ.%当的重组腺病毒甀或H綡术蜗赴螅进行鄙嘶钚允笛椋峁允荆雛组和正常对照组相比,甀刈橄俨《,当时,重组腺病毒甀和訢的转染效率±ズ.%飨愿哂贛为的转染效率.%和。±,而与的转染效率ズ第偷,重组腺病毒甀能够较明显地降低转染碳ち馨拖目的:甈,摘要,畐.
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