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阿维菌素4"-OH氧化酶CYP107Z13的基因克隆、表达及功能验证.pdf

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阿维菌素4"-OH氧化酶CYP107Z13的基因克隆、表达及功能验证.pdf

文档介绍

文档介绍:中国农业科学院学位论文阿维菌素趸窩的基因克隆、表达及功能验证申请学位类别:理学硕士研究方向:微生物分子生物学与基因工程培养单位:植物保护研究所密级:论文编号:硕士研究生:刘卫德指导教师:李梅副研究员专业:生物化学与分子生物学提交日期月珽
㈣㈣篗㈣卸斟蠦】班嘲。禾篗珽:.一
芩枸关于论文使用授权的声明独创性声明研究生签名:童。。年∥月忍弘年‘月/枷锌縡∞本人声明所呈交的沦文怒我个人径导师指导械难芯抗ぷ骷岸盏玫难芯砍果。尽我所知,除了文巾特鮆以标淀和致澎的地方外,论文巾不包含其他人已经笈袭或撰写过的研究成果,也不包含为获衡巾缗蒲г夯蚱渌躺袒沟难换蛑书瓶使用过的材料。与我一同工作的嗣志对本研究所做的任何贞献均已在论文中作了本人完全了鳃中国农蒲г河泄乩琛⑸涤醚П寺畚牡墓娑ǎ矗褐泄┮悼学院有权保留送交论文的复印件拳排蹋市砺畚谋灰嵩暮徒柙模梢圆捎糜坝⑺印或扫描等复制手段保存、汀:编学位论文。琩意‘困农淇蒲г嚎梢杂貌煌绞皆诓研究生签名:明确的说明并表示了谢意。时问:同媒体上发表、传播学位论文的全部或郯分内容。导师签名:;::
一——————————————————————————————————————————————一一一一——黜李炷\\殆徽轮中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目论文作者刘:受德专业研究方向指导教师培养单位芯克硕姓名职称单位签名导师阿维蒴豢趸窩的接闲兜隆、袭达及功能验涎李梅微物保护研究骈专业研究员博譬中斛农科院植保所植物病理学王墒教授硕导口懑导、『呐┮荡笱植物瘸理学巾溺农业大学袋物学农业微生物院微,锵巾因农科院橇保所搏导√答李俊辫巾辩院微生物所微生物学博导√委博譬口会议喉秘粥论文答辩时氐月瓼午韢二行室,锘в敕微生物分了了生物学物学与蘩因:评顾孥豳赵廷舀阅入辩主宋渊鹰博譬、『颀导口邱德文巾湖农科院校缫所博譬√硪导口张杰;刻髋┛圃呵簿蛩≮李少杰员姆譬口颂婷口硕转口博导囝、一。
摘要痬·%值为阿维菌素是一种结构新颖、农畜两用的重要生物源杀虫剂,对阿维菌素懈脑炜梢获得药效更高、杀虫谱更广的甲胺基阿维菌素苯甲酸盐孜。当前,甲维盐的生产是以天然发去保护过程操作复杂、条件要求苛刻,导致了甲维盐合成成本较高且对环境污染严重。寻求廉价、高效、环保的生物催化剂,实现对阿维菌素奈坏闾匾煨匝趸ù蟠蠹蚧孜蔚暮铣刹骤,有利于甲维盐的推广应用。据报道,一些链霉菌具有位点特异性氧化阿维菌素生成维菌素的功能。笔者针对链霉菌进行筛选,获得一株能够高效氧化阿维菌素的不吸水链霉菌菌株对初始浓度为痶陌⑽刈;蚀ィ且驯ǖ赖淖;首罡呔甑牧奖抖啵哂薪大的开发应用潜力。本研究以產为出发菌株,展开了一系列的研究。结果如猛纯寺〖叭旧宀揭频姆椒ǎ菌株基因组中克隆到一条羌易寤虻耐椿颍淙ǔ,共编码霭被岵谢蔖委员会命名为莄基因亚家族的第个新成员。枚嗫奖葱痛蟪Ω司疵咕┧笾柿,建立了组成型启动子调控下的疵咕泶镌靥澹捎迷侍遄;ń刈橹柿WH氡淝η嗔疵咕鶷校瑿馄追治龊虷觳猓な礳基因在中成功表达,并且表达的芾执的电子传递系统实现电子传递,完成位点特异性氧化阿维菌素生成⑽氐姆从Α陨鲜觯重组菌的转化条件进行优化,结果显示,培养基种类、值和菌体的活力状态对重组茵转化阿维菌素的效率有不同程度的影响。其中、改良液体培养基以及活化细胞有利于提高重组菌转化阿维菌素的效率。胮靥澹菇╟的重组质粒玴转入校璄及差光谱法检澳な礐已在谐晒表达,,与铁氧还蛋白和铁氧还蛋白还原酶构建体外重组酶催化体系,通过测定体系中南模竦昧烁弥刈榈鞍滓园⑽匚5孜锸钡拿秆Р问关键词:阿维菌素,氧化酶,δ埽付ρ酵产物阿维菌素为前体,通过化学方法合成,其中最关键的反应步骤是将阿维菌素币籓趸。,且这个保护,.镁暝下:苄肝.!
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。阿维菌素及其衍生物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯阿维菌素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⑽氐难苌铩甲胺基阿维菌素苯甲酸盐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..孜蔚暮铣伞多功能生物催化剂——⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.!埃生物催化在农药合成中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.┮┓┮┤┮┖铣芍械挠τ谜雇本研究的立题依据及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章阿维菌素保甇趸富虻目寺材料

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