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马氏珠母贝抗菌肽的初步分离及抗菌活性分析.pdf

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文档介绍

文档介绍::●●.
—————一●
导师躲/司暗厂年论文作者躲亏良赴论文作者繇孑久挺!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!ā!论文作者签名:寻文⋯日期:山瑀月岁ā戤勘海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明日期:阩月岁·日日期:三勿阩月岁。日易门月原创性声明学位论文版权使用授权说明:Ⅳ日期:.瑃甓嘣耭日“咝Q宦畚娜氖菘狻敝腥姆⒉迹⒖砂础罢鲁獭敝泄娑ㄏ硎芟喙厝ㄒ妗;睾救睁丘进唇┕缟鷌旦坏┤呖~本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海南大学。保密论文在解密后遵守此规定。本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦畚奶峤导日承担。日名师期∥一

马氏珠母贝是我国生产海水珍珠的主要养殖贝类,开展马氏珠母贝抗菌肽的研究有助于揭示马氏珠母贝的免疫机制,发现具有良好活性的新型抗菌药物,提高贝体的健康水平,改善海水珍珠品质,为珍珠养殖业的持续发展提供保障。本文利用酸性缓冲液制备马氏珠母贝外套膜和鳃组织的抗菌肽粗提液,利用票感偷缬静鄞哟痔嵋褐蟹掷出含有抗菌活性成分的蛋白类物质,并对分离的抗菌蛋白进行了性质测定、溶血活性检测和抑菌活性分析。⒙硎现槟副醋橹咕痔嵋旱闹票使用无乳链球菌月硎现槟副唇薪荽碳ぁT诒√件下,分别利用玻璃匀浆器、研钵和橹冉票嘎硎现槟副赐馓啄ず腿织抗菌肽粗提液,采用径向扩散法舛ù痔嵋旱囊志性。通过加热和冻融的方法,研究确定提高组织粗提液抗菌效果的处理条件。结果表明:以终浓度为的无乳链球菌对马氏珠母贝刺激硎现槟副醋橹痔物抗菌活性无显著变化;马氏珠母贝外套膜或鳃组织抗菌肽粗提物制备时,浆机的匀浆效果要优于玻璃匀浆器和研钵;嫠〈碜橹痔嵛上灾高其对溶藻弧菌的抗菌活性;反复冻融则会显著降低外套膜组织粗提物的抗菌效果,因此,在研究过程中应尽量减少样品的冻融次数。⒙硎现槟副纯咕牡姆掷胗爰根据抗菌物质分子量大小的不同,使用票感偷缬静鄱月硎现槟副醋橹泻的肽类抗菌物质进行分离。,利用紫外分光光度计测定抗菌物质中的蛋白浓度。研究结果表明,,胶上显示单一条带,分子量为,该单峰值样品能被蛋白酶猓粲谛分子的抗菌蛋白,蛋白含量为痬⒙硎现槟副纯咕煞值囊志钚匝芯为了确定所分离得到的单峰值样品的溶血活性和抑菌效果,使用血琼脂板孔穴扩散法和液体培养基倍比稀释法分别测定了样品的溶血活性、抑菌谱,得出了该样品的最低杀菌浓度和最低抑菌浓度。研究结果表明,分离得到的马氏珠母贝抗菌肽具有广谱抗菌活性,对藤黄微球菌⒐匣【和绿脓杆菌淖畹鸵志ǘ任./,最低杀菌浓度为痬对金黄色葡萄球菌⑽奕榱辞蚓⒋肠杆菌的最低抑菌浓度为痬畹蜕本ǘ任
痬憾钥莶菅挎吒司腿茉寤【的最低抑菌浓度为痬畹蜕本ǘ任./。抗菌肽的溶血效果表明,溶血圈随样品浓度的降低而减小,当样品中蛋白浓度低于痬保苎Hν耆А关键词:马氏珠母贝、抗菌肽、分离、抑菌活性Ⅱ
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!R一——。咕牡难芯壳熬坝氪嬖谖侍狻目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯咕牡难芯肯肿础璴咕牡挠τ谩,,狙芯康哪康暮鸵庖濉第二章马氏珠母贝抗菌肽粗提液的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯笛椴牧稀笛榉椒ā甹璉植物类抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯哺乳动物抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯禽类抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.昆虫类抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯细菌抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.两栖类抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯鱼类抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯原索动物抗菌肽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯甲壳动物