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靴做储。啤嗡叶勿劢嗍学位论文憾甓咴缕日日期原创性声明学位论文使用授权声明曷嵩本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。
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摘要反义寡核苷酸对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响硕士研究生:杨娟导师:张红教授陈奎生教授郑州大学基础医学院病理学教研室河南省肿瘤病理重点实验室河南郑州结:毫擞不琓且恢殖H旧逑孕砸糯ú。是以多种器官的组织缺陷和错构瘤为特征的系统性疾病,最常表现为脑、肾,心脏,眼,肺以及皮肤出现的良性错构瘤,是由抑癌基因琓突变所引起。与作为肿瘤抑制因子,在细胞生长和增殖过程中起关键性的调节作用。生长因子刺激的/藕磐吠ü姿峄砹迨砬虻鞍琓调控下游效应因子,影响细胞的生长和增殖。研究发现,可通过在大脑中大量存在的一种次琑来发挥对哺乳动物雷帕霉素靶蛋紅琺的功能,从而调节细胞的生长和增殖。将从结合幕罨刺;晃=岷螱的非活化状态,达到抑制的活性。磷酸化的丧失了/复合物作为跃哂蠫酶活性的作用,,通过磷酸化抑制真核细胞起始因子结合蛋白瓸的活性,并激活核糖体蛋白激酶秃颂翘錝鞍准っ琒的活性,从而促进细胞的生长,增值和分化,最终导琓或摘要.
材料和方法采用免疫细胞化学技术,苩锄检测各组细胞中及蛋白致肿瘤的发生。近年来,有关信号通路及其通路中相关基因之间的相互作用,以及与肿瘤发生之间的关系已经成为研究热点,其中包括/通路及其相关基因。研究表明,突变导致的蛋白功能失调可引起疶甌痬藕抛5家斐#贾路荰疾病相关肿瘤的发生,如:胆囊癌、鼻咽癌、喉癌、直肠癌、肺腺癌、肺小细胞癌,膀胱癌等。但有关肿瘤抑制基因在食管癌发生、发展中的作用研究尚未见文献报道。为了探讨基因的异常表达在食管癌发生和发展中的作用,本研究采用反义寡聚核苷酸珹硎彻馨〦细胞,采用ḿ觳庀赴鲋城榭觯徊捎昧魇较赴际酢法检测细胞凋亡率的变化;采用免疫细胞化学技术、检测细胞中及蛋白的表达;采用原位杂交、技术检测细胞中和的表达。人食管癌细胞株由中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室惠赠。。食管癌细胞的分组培养:采用终浓度分别为儿、/腡H綞赴、;同时以终浓度为土的、甇及不转染组分别作为正义对照组、无关对照组和正常对照组9媾嘌。采用ḿ觳飧髯橄赴で榭觥采用流式细胞技术、ḿ觳飧髯橄赴芷诩暗蛲龅谋浠的表达情况。采用原位杂交、技术检测细胞中和的表达情况。统计学处理:,
H咀榭鮥—ы鰄锄杩.,腓胁蚩.、。,结果觳庀赴髯橄赴鲋衬芰Φ谋冉与各对照组相比,各实验组处理因素均对细胞增殖具有较强的促进作用均.,各对照组间细胞增殖率无明显差异。该作用具有浓度及时间的依赖性,且不同浓度及不同时间段各实验组两两比较,差异均有统计学意义。魇较赴羌觳飧髯橄赴芷诘那榭与正常对照组疓..,.、.,.相比,各实验组各期细胞数所占的比例有所不同,/期细胞所占比例减少,谙赴急壤黾樱畋鹁型臣蒲б庖。各实验组对比,訣赴芷诘挠跋炀哂信ǘ鹊囊览敌裕也煌ǘ雀魇验组两两比较,,浓度为组、椤组的各实验组细胞早期凋亡率分别为:.、.,.砥诘蛲雎史别为:...,縊.。分别为...。.%⑽薰囟哉兆早期凋亡细胞:.%,晚期凋亡细胞:.%。:.和正义对照组缙诘蛲鱿赴.%,晚期凋亡细胞:.%。:..%啾龋飨约跎伲且差异均具有统计学意义。各凋亡率及值随染浓度的增加而减少,各浓度之间两两比较,,咖.、.,赴蠺鞍椎表达均有所下降,.,此孀臫H九ǘ鹊脑黾雍褪奔涞难映ぃ制蛋白表达的能力增强。..,.、.、
H咀榭跤膇恤恻∞.,H咀榭鮥蝴和时间依赖性琲蝴∞蛐...,,.,隻衍.、