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⋯一:露%叶嗍铀月学位论文懈专劳吁嗍¨铀肌原创性声明学位论文使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。,
摘要小肠结肠炎耶尔森菌广泛分布于自然界,是能在冷藏温度下生长的少数肠道致病菌之一,主要经消化道传播,是一种重要的食源性致病菌,很多国家都已将其列为进出口食品的常规检测项目。小肠结肠炎耶尔森菌对人类和动物具有明显的致病性,感染后可表现为一系列不同症状,除能引起胃肠道症状外,还能引起呼吸系统、心血管系统、骨骼结缔组织等局部组织和全身的疾患,甚至可引起败血症,造成死亡。致病性细菌的共同特征就是突破宿主的防御机制,与细菌生存特征赴外生存或细胞内寄生芮邢喙亍V虏⌒孕〕岢ρ滓且恢旨嫘韵赴内致病菌,粘附侵袭性是其毒力机制的重要特征,介导粘附侵袭相关功能的基因被认为是其毒力机制的一个重要因素。目前可将国内外己获得的致病菌株的口蚍治种类型:高致病株疧:来源的型;低致病株来源的型;新发现序列型。小肠结肠炎耶尔森菌的粘附侵袭机制非常复杂,是多种已知和未知因素综合作用的结果,一旦某种因素发生改变,就有可能引起其功能表型的相应改变,因而粘附侵袭位点基因的核酸序列出现改变时,就有可能会引起其粘附侵菇ú煌蛄行蚢基因的重组克隆菌株。锰逋庾橹赴掣角窒笛樘剿鱝基因序列多态性可能会引起的鞍坠δ艿母谋浼捌溆氩煌镅G逍途昙渲虏⌒圆钜斓墓叵怠醪椒治龃硇滦蛄行涂阽嗷虻腎菌株在粘附侵袭功能及细菌毒力方面是否出现改变。方法袭表型的改变。目的
结论≡穹直鸫种不同序列型口虻闹虏⌒砸ü齈扩增获得基因序列后,构建甌重组质粒,分别转入大肠杆菌非致病性小肠结肠炎耶尔森菌L粞】寺【杲刑匾煨訮和测序鉴定。镁ㄕ妨拥难粜钥寺【。计算各个克隆菌株的粘附侵袭效率,筛选粘附侵袭表型阳性克隆菌株,并比较不同序列型克隆菌株在粘附侵袭功能上是否存在差异,尤其关注新发现序列型蛘掣角窒δ艿母谋洹结果璓扩增、测序鉴定,成功构建重组质粒甌,。甊峁允荆煌蛄行涂趂,基因在各种克隆菌株中成功转录。逋庹掣角窒笛橄允荆孕∈蟾咧虏≈闥疧:代表的型大肠杆菌克隆菌株能够稳定表达粘附侵袭功能,而对小鼠低致病株/淼腁痛蟪Ω司寺【旰虸/淼男路⑾諥型大肠杆菌克隆菌株均只有晗允菊掣角窒δ埽种类型大肠杆菌克隆菌株对两种组织细胞的粘附侵袭作用无系别差异。晕⒕迪鹿鄄种粘附侵袭阳性的大肠杆菌克隆菌株与细胞作用后的染色图片,结果显示:与致病性小肠结肠炎耶尔森菌相比,克隆菌株沿细胞排列的形态出现改变,呈点状、散在分布。种类型非致病性小肠结肠炎耶尔森菌口蚩寺【昃槐硐终掣角袭的功能,并且在获得蚝螅浔旧砉逃械姆翘匾煨哉掣叫食鱿至讼陆怠晒菇ú煌蛄行涂诙┗虻拇蟪Ω司寺【旰头侵虏⌒孕〕岢炎耶尔森菌克隆菌株。ü逋庹掣角窒笛榛竦煤煌蛄行涂趂,基因且粘附侵袭表型阳性的大肠杆菌克隆菌株。摘要
趂,基因序列多态性对不同生物血清型致病性菌株的致病毒力可产生影响:非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中口基因的缺失有可能是其致病毒力缺失的诒敬窝芯恐校型以蚩寺【暧階涂趂,基因克隆菌株在粘附侵袭功能上不存在差异。关键词:小肠结肠炎耶尔森菌序列多态性粘附侵袭原因之一。口摘要
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