文档介绍：第九次实验
肠道杆菌
学****要求
观察肠道杆菌的形态染色
观察肠道杆菌在SS培养基上的生长情况及菌落特征。
掌握鉴别肠道杆菌的主要生化反应
熟悉肥达反应的操作方法,掌握判定肥达反应结果的方法。
实验内容
1、肠道杆菌形态观察(革兰染色、油镜观察)—(每人做)
大肠杆菌伤寒杆菌痢疾杆菌变形杆菌
2、肠道杆菌的培养—SS平板、双糖铁培养基(示教)
大肠杆菌伤寒杆菌痢疾杆菌变形杆菌
3、肠道杆菌的接种—SS平板、双糖铁培养基(每组做一份)
4、肠道杆菌的生化反应— I M Vi C (示教)
5、肠道杆菌的血清学试验
肥达(Widal)反应(示教)
6、肠道杆菌的检查(录像)33
痢疾杆菌
伤寒杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌(非致病菌)在SS培养基上可形成相对较大,不透明,红色的菌落。
致病性肠道杆菌在SS培养基上形成相对较小,半透明,无色或淡黄色的菌落。
SS平板:为强选择性培养基,内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿,可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长;还含有乳糖和中性红,一般肠道致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨,产生碱性物质,故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖,产酸使指示剂变红,故菌落呈红色。
该培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。指示剂为酚红。葡萄糖与乳糖的比例为1:10。
若细菌分葡萄糖、乳糖产酸产气,使斜面与底层均呈黄色,且有气泡。
若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低;而上层少量酸因接触空气而氧化,并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物,呈红色。
若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。
配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。
I M Vi C :鉴别肠道杆菌的四种常用方法
例如大肠杆菌的结果为:+ + - -
产气杆菌的结果为:- - + +
I 靛基质试验(吲哚试验):某些细菌具有色氨酸酶,可以分解蛋白胨的色氨酸生成靛基质,也称吲哚,与对二***氨基苯甲醛作用生成红色的玫瑰吲哚(阳性)。
玫瑰吲哚