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/错体枷移厂日月日期:暌日期:油『『年铜学位论文使用授权声明原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。日
神经干细胞移植对新生大鼠蚿基因的影响摘要普旦尿硕士研究生:侯艳艳专业:儿科学郑州大学第三临床学院脑缺氧和脑血流减少或中断造成大脑水肿及继发重构,持续的脑细胞丢失及脑室周围和邻近皮质白质囊泡化,导致神经细胞大量丢失,引起相应的神经功能障碍,是导致儿童脑性瘫痪的主要原因。近年来随着新生儿抢救技术的提高,发病率逐渐增高。目前中重度预后不良,而目前的治疗方法疗效有限,寻找有效的细胞重建途径,替代损伤的神经细胞,是治疗的新的理念和途径,神经干细胞琋移植是最近研究的新的治疗方法。是神经细胞的天然前体细胞,是一类具有多分化潜能的未分化细胞,移植后在体内能够分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞等多种神经细胞,从而发挥其替代损伤细胞修复损伤脑组织的作用。可以从哺乳动物的胎脑、脐血、脐带、骨髓、胎脑、胎盘羊膜细胞干细胞中诱导产生,然而因受多种因素限制,神经干细胞体外诱导成功率不高,且移植后在宿主体内的存活率尚低,因此,基因工程神经干细胞就成为了神经干细胞的主要来源。动物和临床研究实验均已证实用定向分化的神经干细胞移植治疗脑损伤、帕金森氏病、脱髓鞘疾病、老年性痴呆、脑梗塞以及恶性脑肿瘤、脊髓损伤、癫痫等起到了良好疗效,为导师:王军河南郑州日缺氧缺血性脑损伤.,歉髦衷蛞鸬摘要
方法目的使用常规方法难以见效的神经疾患治疗提供了广阔的思路和诱人的前景。新生动物脑组织内存在神经干细胞,如何使这些神经干细胞移植后到达治疗区,并定向分化为目的神经细胞一直是科学家们致力研究的热点。已有研究证明,神经干细胞的定向分化受多种因素的制约,包括基因、转录因子以及神经干细胞所处的局部微环境,虮闶钦庵疃嘁蛩刂弧4罅垦芯勘砻餍律后脑结构与功能重建是胚胎期发育的再现和延续,蛟诖竽苑⒂过程中扮演着重要角色。蚴悄壳耙阎5牡骺卮竽越峁狗⒂墓丶因,其缺失将导致整个大脑半球发育不良。蛟谏笕钥沙中泶镉谏经干细胞聚集区的室管膜下区及海马等部位,在神经干细胞增殖和分化过程中发挥着重要作用。然而骺厣窬上赴鲋撤只幕剖鞘裁在神经干细胞增殖分化过程中发挥着怎样的作用,目前的研究尚无明确回答。国外的研究表明,骺厣窬上赴鲋晨赡苡胍种苝基因的表达有关。本实验通过脐血源性神经干细胞移植,,探讨移植对二者的影响。为基因工程神经干细胞的应用提供理论依据。本实验旨在通过分离和培养脐血间充质干细胞,定向诱导其向神经干细胞方向分化,通过尾静脉途径移植入新生大鼠体内,采用原位杂交法,分别于各时间点测定及移植后鳩基因与騧达的变化水平,记录二者变化趋势,探讨及移植后海马区二者表达变化的关系,从基因水平进一步探讨神经干细胞增殖与分化的调控机制,对提高移植后在脑组织受损部位增殖与分化效率具有重要意义,为基因工程神经干细胞在临床进一步应用提供理论依据。收集健康足月产妇胎盘脐带血,分离出间充质干细胞,采用细胞培养法,培养脐血问充质干细胞,并定向诱导分化,利用免疫细咆化学法鉴定。以摘要
结果龄新生大鼠为研究对象,,组,假手术组,各组分别只。采用经典法制作模型,模型制作后将培养的移植入大鼠体内,设模型制作成功后、、、9鄄斓恪7直鹩诟鞴鄄斓憬ù笫处死,取右侧半球脑组织,%甲醛液固定,常规石蜡包埋固定,染色鉴定模型,以原位杂交法,测定各时间点在海马区的表达变化,观察神经干细胞移植对二者表达的影响,探索二者的内在联系。原代培养的脐血间充质干细胞形态学观察培养的原代呈圆形,旌蟪识趟笮危ジ龊耍酃庑越锨浚笾鸾伸出突起,期间混有破骨样细胞,体积较大,呈圆形,多个核。天左右细胞铺满瓶底。脐血源性神经干细胞的诱导及鉴定原代细胞铺满瓶底%时,加入诱导剂,,诱导其向神经干细胞方向分化。免疫细胞化学染色,观察、粜韵赴谟盏后表达较诱导前明显增加。常规染色