文档介绍：谨以此论文献给尊敬的林洪教授以及我挚爱的家人和朋友。郑礼娜
\嗍鼎形觥裼耖过以虾类过敏原的活性分析及其抗原表位的研究一、¨学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:
≮赤鹭⋯⋯⋯兰兰兰兰竺三竺塑里兰三三竺二兰一竺二三一学位论文作者签名:却榱导师繇独创声明学位论文版权使用授权书月日垫逡直墓丝置要挂型直盟的:奎拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑な槭签字日期:沙本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ签字日期:沙,,年
虾类过敏原的活性分析及其抗原表位的研究摘随着现代社会的发展,人们饮食结构的变化,与食物直接相关的过敏疾病发病率日益增高,给人们的生命健康造成了巨大威胁。虾类产品属于我国产值比较高的甲壳类海产品,由于味道鲜美、营养丰富,深受消费者的喜爱。然而虾类海产品属于罄嗍澄锕粼唬剐矶嘞颜弑ナ芄糁⒆吹睦拧1韭畚淖重对虾类过敏原的鉴定和活性消除方法进行研究,结合生物信息学方法进一步分析过敏原的表位区域及氨基酸组成性质,并对表位进行空间定位。主要内容如下:⒁缘抖钚露韵何Q芯慷韵螅掷牒痛炕朔肿恿课闹饕9粼蛋白,利用基质辅助激光解析电离/飞行时间质谱对其进行肽质量指纹图谱鉴定,并对得到的结果采用搜索引擎在数据库上进行搜索。结果表明刀额新对虾主要过敏原为原肌球蛋白,与斑节对虾原肌球蛋白匹配分值最高为呛想亩酰蛄懈哺锹饰ィ挥肫渌藜棺刀锶绺忱因⒁掠等的原肌球蛋白的序列覆盖率也很高。这一结果不仅表明了刀额新对虾与其它甲壳类海产品过敏原存在着高度同源性,而且为其与甲壳类及其它无脊椎动物主要过敏原之间存在严重交叉反应的现象提供了理论依据。⒃诩说抖钚露韵旱闹饕9粼螅徊椒治隽顺<燃庸し绞对其过敏原活性的影响。选取煮、蒸、高压这三种方法,分别处理刀额新对虾不同时间。通过检测总蛋白和主要过敏原含量以及活性的变化,分析对虾类过敏原的影响。结果表明经过三种热处理后,主要过敏原蛋白仍然存在,但其活性有不同程度的下降。,但影响不大,全蛋白的免疫活性仍有不同程度的降低。其中高压对活性的降低程度最大,分钟时免疫活性降低了%。但质地剖面分析结果表明,高压处理对虾肉质构破坏最大,仍需进一步优化高压处理工艺,在降低虾致敏活性的同时,保持其口感及营养。⒗蒙镄畔⒀Х椒ǘ韵汗粼捌渌卓抢喙粼涞耐葱越分析,并绘制出系统进化树。结果表明甲壳类过敏原原肌球蛋白氨基酸序列十分保守,序列之间同源性很高。其中斑节对虾、凡纳滨对虾过敏原同褐美对虾主要过敏原陌被嵝蛄型耆嗤
采用等生物信息学软件分析亩督峁埂⑶姿性、溶剂可及性、可塑性、抗原指数等多个性质,间接预测线性表位区域,并结合鲈谙咄径员砦坏脑げ饨峁猩秆。玫隹乖砦缓蠼斜砦肽的固相合成。采用竞争産椒ǎ没颊哐G宥员砦浑牡幕钚越谐步验证。结果表明其中霰砦欢嚯奈V饕9粼砦唬渲杏辛礁鲆郧拔丛有研究者报道过。对表位区域的氨基酸分析中发现精氨酸⒗野彼、苯丙氨酸⑺堪彼以及谷氨酸种氨基酸在表位区域出现概率很高。⒁灾碓∏虻鞍譴为模板,利用甅以及邢关的同源建模功能对目占浣峁菇性げ狻2捎迷悠骄颇堋⒎肿犹逑动力学分析以及拉氏构象图对建模结果进行评估。结果表明模拟形成的构象有较高的稳定性和合理性。从构象中可以看出,占浣峁贡冉霞虻ィ没有复杂的三、四级结构,二级结构主要以菪V鳌4庸瓜蠓矫娣治觯琍チ醋陨硇纬晒瓜笮捅砦坏募嘎什淮螅咝员砦辉诳占渲械亩ㄎ唤峁蚕允基本上线性表位全部暴露在外。⒗冒被嵬槐涞姆椒ㄑ芯縋砦恢械墓丶被幔≡馪中和饬教醣砦浑模渲械幕钚园被崽娲H嘶蛑碓球蛋白中相应的非活性氨基酸。采用産赫噶C庖叩姆椒ḿ觳馔槐浔砦肽过敏活性的变化,分析对活性影响较大的氨基酸残基。结果表明,中所对应的表位区域中,和氨基酸替代为人原肌球蛋白相应位置的氨基酸螅槐浔砦浑挠牍艋颊哐G錓的结合能力有明显的下降,说明这两者为该表位中的关键氨基酸。其他表位中的关键氨基酸还有待于进一步分析。关键词:虾过敏原,鉴定,消除,表位,预测,定位Ⅱ
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